[发明专利]基于昆虫病毒出芽后细胞膜及细胞器膜蛋白的分离方法无效
申请号: | 200810120475.9 | 申请日: | 2008-08-29 |
公开(公告)号: | CN101358206A | 公开(公告)日: | 2009-02-04 |
发明(设计)人: | 张耀洲;陈健;吕正兵;吴祥甫 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C12N15/866 | 分类号: | C12N15/866;C12N15/62;C12N7/01 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310018浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于昆虫病毒出芽后细胞膜及细胞器膜蛋白的分离方法:通过重组杆状病毒Bm-sp-HA-tm感染昆虫宿主细胞后增殖,在病毒大量出芽后,宿主细胞膜破裂,经分离、超滤,获得细胞膜及细胞器膜蛋白。本发明提供了一种大量分离膜蛋白的方法,利用杆状病毒感染昆虫细胞后以出芽的方式大量释放出来,致使细胞破裂,细胞剩余的膜因疏水作用而形成膜“小球”状,并且膜带有杆状病毒表达的HA融合蛋白,以此为膜蛋白的标志,经过多步纯化步骤获得宿主细胞剩余膜,过750kD中空纤维膜超滤后,再经HPLC和质谱分析,鉴定并找出目标膜蛋白。 | ||
搜索关键词: | 基于 昆虫 病毒 出芽 细胞膜 细胞器 膜蛋白 分离 方法 | ||
【主权项】:
1、一种基于昆虫病毒出芽后细胞膜及细胞器膜蛋白的分离方法,其特征在于:通过重组杆状病毒Bm-sp-HA-tm感染昆虫宿主细胞后增殖,在病毒大量出芽后,宿主细胞膜破裂,经分离、超滤,获得细胞膜及细胞器膜蛋白。
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