[发明专利]一种饲料有效磷测定方法

摘要

本发明涉及一种饲料有效磷评定的新方法，该方法采用外翻肠囊测定饲料磷体外吸收率，包括如下步骤：胃蛋白酶消化、胰蛋白酶消化、进行外翻肠囊磷的体外吸收等。将外翻肠囊放入试管中(消化饲粮)，加入5mLTris－Krebs缓冲液，覆盖外翻肠囊并摇匀，继续在39℃的水浴中恒温培养40min。将肠囊取出，用缓冲液将肠囊表面冲洗干净后，放入干净的坩埚中于105℃下烘24小时，烘干后，将坩埚放入马福炉中灼烧8小时，溶解灰分，采用钼蓝法测定其中总磷含量。

主权项

1、一种饲料有效磷测定方法，包括如下步骤：(1)胃蛋白酶消化：准确称取待测饲料样品，放入玻璃试管中，加入适量胃蛋白酶溶液振荡摇匀，用palafilm胶密封，在水浴中恒温培养；(2)胰蛋白酶消化：将经胃蛋白酶消化后的食糜与胰蛋白酶溶液混匀，用palafilm胶密封，继续在水浴中恒温培养；(3)外翻肠囊的制作：参照Seal和Heaton(1983)的方法，用生理盐水将具有生理活性的猪十二指肠冲洗干净，剪成约5cm的肠段，小心将肠段外翻后，先结扎肠囊的一端，然后向浆膜腔内注入不含磷的Tris-Krebs缓冲液，结扎肠囊的另一端，即成外翻肠囊；(4)磷的体外吸收：将外翻肠囊放入已进行(1)、(2)酶饲料样品消化的试管中，加入缓冲液，覆盖外翻肠囊并摇匀，继续在水浴中恒温培养；(5)磷的测定：将肠囊取出，用不含磷的Tris-Krebs缓冲液将肠囊表面冲洗干净后，放入干净的坩埚中，于105℃下烘24小时，烘干后，将坩埚放入马福炉中灼烧8小时，溶解灰分，采用钼蓝法测定灰分中的总磷含量。