[发明专利]一种丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测的方法

摘要

本发明公开了一种丙型肝炎病毒(HCV)抗原抗体联合检测的方法，将抗HCV核心抗原的单克隆抗体与嵌合抗原同时包被酶联板进行检测，能大大缩短HCV病毒检出的“窗口期”。此外，通过对HCV全长核心抗原进行改构、嵌合非结构区并实现嵌合抗原的表达，能尽可能检出血清中的HCV抗体并与包被的单抗相容，避免了嵌合抗原与单抗相互结合，其阳性检出率和PCR阳性检出率接近。本发明的HCV检测方法还具有操作简单、价格低廉的优点，适于推广使用。

主权项

1、一种丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测的方法，其特征在于通过以下步骤实现：1)通过计算机软件分析丙型肝炎病毒不同亚型的核心抗原序列，确定2个高度保守、抗原性强的氨基酸序列：QDVKFPGGGQIVGGVY、PRGSRPSWGPTDPRRR；2)利用单克隆抗体技术制备2株高效分泌特异性抗HCV核心抗原的鼠源杂交瘤细胞株，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号分别为CCTCCNO：C200823、CCTCC NO：C200824，进行抗体纯化得到高比活的抗HCV核心抗体；3)将冻干的辣根过氧化物酶纯化后，与制备的单抗混合形成酶结合物；4)重构HCV核心抗原和其它非结构蛋白的嵌合抗原；5)将以上制备的抗HCV cAg的单克隆抗体和嵌合抗原同时包被酶联板，加入待测样品进行检测。