[发明专利]细胞疾病靶标的负选择无效

专利信息
申请号: 200810146797.0 申请日: 2008-08-29
公开(公告)号: CN101659990A 公开(公告)日: 2010-03-03
发明(设计)人: 童贻刚;安小平;张昕 申请(专利权)人: 北京微生物流行病研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/54;C12N15/867;C12N5/10
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 代理人: 刘晓东;彭鲲鹏
地址: 100071*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及细胞疾病靶标的负选择,更具体地说,本发明涉及使用基于RNAi的负筛选测定来鉴定参与活化调节元件的基因。
搜索关键词: 细胞 疾病 靶标 选择
【主权项】:
1.在宿主细胞中鉴定促进调节元件活性的基因组序列的方法,其包括确定在暴露于筛选剂后仍存活的宿主细胞中表达的小发夹RNA分子的多核苷酸序列,其中:(a)所述细胞经改造含有表达效应子蛋白的表达盒,在所述细胞暴露于所述筛选剂时所述效应子蛋白具有细胞毒性,(b)将编码所述效应子蛋白的序列与促进该效应子蛋白表达的调节元件可操作性连接,和(c)用至少一种表达小发夹RNA分子的载体转化所述细胞,其中所述小发夹RNA分子:(i)具有与宿主细胞基因组序列互补的多核苷酸序列,和(ii)靶向具有上述基因组序列的核酸由此阻止该基因组序列的表达,其中所述小发夹RNA分子的互补多核苷酸序列的身份指示了宿主细胞的所述基因组序列,当宿主细胞中不存在该小发夹RNA时所述基因组序列将促进所述表达盒调节元件的活化。
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