[发明专利]一种获取4型戊型肝炎病毒重组多肽的方法无效
| 申请号： | 200810155378.3 | 申请日： | 2008-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN101381731A | 公开（公告）日： | 2009-03-11 |
| 发明（设计）人： | 周乙华;潘金顺;吴超;庄辉 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12N15/51 | 分类号： | C12N15/51;C12N15/70;C07K14/08 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人： | 孙 鸥 |
| 地址： | 210008*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及获取4型戊型肝炎病毒重组多肽的方法。本发明采用Trizol抽提戊肝患者血清中的总RNA，利用RT-PCR技术分别扩增包含4型HEV ORF2的主要免疫表位多肽和截短多肽的基因片断，将扩增的基因片断插入表达载体pRSET-C，将该质粒转化BL21(DE3)plyss感受态细菌，在IPTG诱导下进行表达，采用Ni-NTA树脂层析纯化，最终获得高纯度的重组多肽。本发明解决了以往存在的血清中其他一些物质和主要免疫表位多肽发生非特异性结合，从而干扰以抗原抗体反应为基础的戊型肝炎ELISA检测方法的缺陷。本发明提供了一种成本低、简便易行的获取4型戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽及其截短多肽的方法，具有良好的抗原性和免疫原性，可排除非特异性吸附对戊型肝炎检测的干扰。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 获取 型戊型 肝炎 病毒 重组 多肽 方法 | ||
【主权项】：
1. 一种获取4型戊型肝炎病毒重组多肽的方法，其步骤为(1)采用Trizol抽提戊型肝炎患者血清中的总RNA，再利用RT-PCR技术分别扩增包含4型HEV ORF2的主要免疫表位多肽和截短多肽的基因片断；(2)将扩增的基因片断插入表达载体pRSET-C；(3)再将该质粒转化BL21(DE3)plyss感受态细菌，在IPTG诱导下进行表达；(4)采用Ni-NTA树脂层析纯化，最终获得高纯度的重组多肽。
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