[发明专利]去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法

摘要

本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产，提供一种去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法，包括如下步骤：热水处理少量原种并生产、以其再生植株经斑点酶标免疫试验(DB－EIA)检测为阴性的茎尖为外植体，经诱导培养、继代增殖培养、促根培养、假植及二级或三级苗圃扩繁生产健康种苗，并在苗圃扩繁中注意砍种工具(蔗刀)的消毒，在种苗出圃用于大田生产用种前，抽样取蔗茎汁用DB－EIA检测RSD病菌，确保提供合格种苗。本发明的优点是：能彻底去除甘蔗种苗宿根矮病病原菌，年繁殖系数高达1万倍以上，且种苗无变异，具有快速、高效、安全的优点，适合工厂化、规模化、标准化生产甘蔗健康种苗。

主权项

1.一种去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：①.原种处理和生产：采集甘蔗品种主茎，砍成双芽段，选取若干有效芽段，经49.5～50.5℃水浴处理2～3h，然后在35℃～38℃光照培养箱中催芽3d～5d，催芽后育苗于35℃以下的温室中，待蔗苗长成2～4片叶时，定植于网室苗圃中，待甘蔗生长至10个芽左右，用经75％酒清浸泡消毒的蔗刀砍取整条蔗茎，并取汁用斑点酶标免疫试验法(DB-EIA)检测RSD病菌；②.外植体选取与灭菌：取步骤①中经DB-EIA检测结果呈阴性且生长健壮的蔗茎顶芽进行灭菌处理，作组织培养外植体；③.外植体诱导培养：将步骤②灭菌处理后的蔗茎顶芽在无菌条件下，切取其3～5mm的茎尖组织接种于诱导培养基上，诱导产生丛芽；④.继代增殖培养：将步骤③诱导分化的丛芽切成单株接种于增殖培养基上，进行继代增殖培养，在27～28℃散射光下培养，15～20d继代一次，继代数以不超过10代为宜；⑤.促根培养：将步骤④长至5～6cm高的小苗转接于生根培养基上，进行生根培养；⑥.假植：当步骤⑤生根小苗生长至6～8cm高，根系发育健壮后，将生根瓶苗移到自然光下炼苗2～3d，取出洗去苗上的培养基，种植于苗圃上，按常规管理，苗高35～45cm且生长健壮的假植苗可移栽于大田进行扩繁；⑦.苗圃扩繁：将步骤⑥中的假植苗定植于大田建立一级健康种苗圃，再通过二级或三级苗圃扩繁，在从上级苗圃采苗进入下级苗圃扩繁时，采苗工具需用75％的酒精浸泡消毒5min以上，方可用于采苗，以防交叉感染；⑧.种苗RSD检测：将步骤⑦扩繁的种苗，在种苗出圃用于大田生产用种前，抽样取蔗茎汁用DB-EIA检测RSD病菌，当蔗茎感染率为0时，种苗合格，可供大田生产种植。