[发明专利]一种猪氟烷基因基因型的检测方法无效
申请号: | 200810200152.0 | 申请日: | 2008-09-19 |
公开(公告)号: | CN101358245A | 公开(公告)日: | 2009-02-04 |
发明(设计)人: | 李建颖;刘炜;吴昊旻;马芳芳;黄国庆 | 申请(专利权)人: | 上海市动物疫病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;G01N21/64 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 | 代理人: | 林炜 |
地址: | 201103上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种猪氟烷基因基因型的检测方法,根据猪氟烷基因突变位点两端的碱基序列设计两组不同的引物,将样品DNA分别与两组引物同时进行PCR扩增,通过PCR扩增产物的荧光信号强度变化监测产物量的变化,从而判断其基因型。本发明要解决现有技术中的检测猪氟烷基因基因型的方法准确率低、操作步骤多、过程复杂、时间长、检测试剂有毒的技术问题,提高了检测准确性,简化了操作程序,避免了有毒有害试剂的使用。 | ||
搜索关键词: | 种猪 烷基 基因型 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种猪氟烷基因基因型的检测方法,其特征在于包括如下步骤:a)对猪氟烷基因进行PCR扩增,然后对扩增出的碱基片段进行碱基测序,确定猪氟烷基因的突变位点,根据突变位点两端的碱基序列设计两组引物,其中一组引物的上游引物3’端和野生型的基因位点匹配,另一组引物的上游引物3’端和突变型的基因位点匹配,两组的下游引物相同;b)将待检测猪的样品DNA分别与野生型引物、突变型引物在两个反应体系中同时进行PCR扩增,扩增后每个样品与每组引物产生一个荧光信号,即每个样品产生两个荧光信号,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加,每经过一个循环,收集一次荧光信号,通过荧光信号的强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光信号强度曲线图,根据两个荧光信号的增强先后次序即可得出猪氟烷基因的基因型。
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