[发明专利]固体5’-磷酸二酯酶及其制备方法和应用有效
申请号: | 200810201058.7 | 申请日: | 2008-10-10 |
公开(公告)号: | CN101429502A | 公开(公告)日: | 2009-05-13 |
发明(设计)人: | 邱蔚然;曹静;谢胜;闫蓬勃;邱志云 | 申请(专利权)人: | 南通秋之友生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12P19/30 |
代理公司: | 上海金盛协力知识产权代理有限公司 | 代理人: | 罗大忱 |
地址: | 226236江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种固体5’-磷酸二酯酶及其制备方法和应用,制备方法包括如下步骤,(1)液体酶浓缩液的提取,(2)在步骤(1)提取的液体酶浓缩液中加入沉淀剂,收集糊状5’-磷酸二酯酶沉淀物,(3)然后将沉淀物对重量浓度对0~1%的甘油水溶液透析,(4)将透析液喷雾干燥,即可获得5’-磷酸二酯酶粉末。上述方法制备的固体5’-磷酸二酯酶粉末,活力高达10000U/g以上,常温下保存性能稳定,且不含磷酸单酯酶和3’-磷酸二酯酶活力,应用此高活力酶可降解高浓度核糖核酸(RNA)获得高浓度5’-核苷酸。核苷酸的转化率可高达90%以上,生成的核苷类物质减少,有利于后续的分离纯化工艺,有效地提高了生产效率,降低了成本。 | ||
搜索关键词: | 固体 磷酸二酯酶 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1. 固体5’-磷酸二酯酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)液体酶浓缩液的提取;(2)在步骤(1)提取的液体酶浓缩液中加入沉淀剂,收集糊状5’-磷酸二酯酶沉淀物;所述沉淀剂选用硫酸铵或有机溶剂,所述有机溶剂为乙醇;当沉淀剂选用硫酸铵时,其用量为在所述浓缩液达到40-80%饱和度;当沉淀剂选用乙醇时,乙醇的重量用量为浓缩液的3~5倍;(3)然后将沉淀物对重量浓度对0~1%的甘油水溶液透析,将透析液干燥,即可获得5’-磷酸二酯酶粉末。
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