[发明专利]一种人巨细胞病毒(HCMV)荧光PCR检测方法无效
| 申请号： | 200810201649.4 | 申请日： | 2008-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN101760560A | 公开（公告）日： | 2010-06-30 |
| 发明（设计）人： | 何剑军;吴大治;夏懿 | 申请（专利权）人： | 上海复星医药(集团)股份有限公司;上海复星医学科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200010*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种人巨细胞病毒(HCMV)荧光PCR检测方法。本发明分别针对人巨细胞病毒(HCMV)基因组的UL122和UL123基因设计了两组检测引物和探针，通过同时检测两个基因降低了因HCMV基因组发生突变导致的假阴性率的发生。本发明技术能快速、简便的对HCMV DNA进行定性和定量检测，具有较高的特异性和灵敏性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 巨细 病毒 hcmv 荧光 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种人巨细胞病毒(HCMV)荧光PCR检测方法，其特征在于包含两对特异性引物和两条特异性探针，扩增目标片段长度分别为91bp和160bp，序列为：引物1：5`-ACCCTGTTCTTCCTCGCTAT-3`(Seq No.1)引物2：5`-GCCCGAGCCCGACTTTA-3`(Seq No.2)引物3：5`-CCAGTGAATTTCTCTTCCGTCT-3`(Seq No.3)引物4：5`-CATAGAGATAGCGATAAATGAGTC-3`(Seq No.4)探针1：5`-GATACAGCCGGCGGTATCGA-3`(Seq No.5)探针2：5`-CTCCTTGATTCTATGCCGCACCAT-3`(Seq No.6)或者与上述序列同源性大于75％的序列、或者上述所有序列的碱基互补序列。其中，引物1、引物2与探针1组合，用于检测HCMV基因组UL122基因；引物3、引物4与探针2组合，用于检测HCMV基因组UL123基因。两条标记探针的荧光发光基团可以相同也可以不同，为FAM、TET、JOE、Cy3、Cy5、Cy5.5、Fluorescein、Rhodamine、Rhodamine Red、Rhodamine Green、Rhodamine 6G、Oregon Green 488、Oregon Green 500、Oregon Green 514、Texas Red、TAMRA、Inosine、HEX、FITC、Acridine orange、或ROX中的任意两种组合；荧光淬灭基团为DABCYL、DABSYL、TAMRA、BHQ-1、BHQ-2或BHQ-3中的任意一种或一种以上的组合。
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