[发明专利]一种核酸等温扩增检测甲肝病毒的方法及试剂盒

摘要

本发明涉及一种核酸等温扩增检测甲肝病毒(HAV)或减毒疫苗的方法及其试剂盒，检测步骤依次包括：甲肝病毒RNA模板在60～70℃下解链后降温；加入逆转录酶、核糖核酸酶H、RNA聚合酶，在引物的引导下于37～42℃进行等温扩增，获得RNA扩增子；然后利用纳米金探针和捕获探针检测扩增子，通过层析杂交显色反应获得检测结果。杂交膜出现显色条带为RNA阳性，无条带为阴性。采用本方法的试剂盒可快速准确地检测甲肝病毒或甲肝减毒疫苗中的RNA。

主权项

一种甲肝病毒(HAV)核酸等温扩增检测方法，采用逆转录-转录和纳米金探针检测层析杂交原理，其扩增对象为从HAV中提取的RNA模板；其特征在于，RNA模板通过采用逆转录酶、核糖核酸酶H以及RNA聚合酶等温扩增，产生的大量RNA扩增子和纳米金颗粒标记的检测探针、生物素(或地高辛)标记的捕获探针结合形成杂交复合物引起光学性质变化，最后该复合物和固定在层析膜上亲和素(或抗地高辛抗体)结合形成显色检测条带。