[发明专利]人可溶性鸟苷酸环化酶的高效制备方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，涉及一种人可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的高效制备方法。本发明方法通过如下步骤：(1)将人可溶性鸟苷酸环化酶核苷酸编码序列装入表达载体，并转化表达用大肠杆菌菌株；(2)将(1)所得菌株接种于改进后的TB培养液，IPTG诱导表达过夜；(3)将(2)所得菌体破菌，离心，过Ni-NTA柱，tev酶酶切，过Ni-NTA柱，heme重组。制得纯度达90％以上的人可溶性鸟苷酸环化酶蛋白，产量达20mg/L以上，本方法能克服目前人可溶性鸟苷酸环化酶产量较低，成本较高，不能满足对sGC的应用需求的缺陷，是目前产量最高的低成本表达方法。

主权项

人可溶性鸟苷酸环化酶的高效制备方法，其特征是，该方法包括以下步骤：(1)将人可溶性鸟苷酸环化酶核苷酸编码序列装入表达载体，并转化表达用大肠杆菌菌株；(2)将(1)所得菌株接种于改进后的TB培养液，IPTG诱导表达过夜；(3)将(2)所得菌体破菌，离心，过Ni-NTA柱，tev酶酶切，过Ni-NTA柱，heme重组即可。