[发明专利]一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法

摘要

本发明涉及分析化学领域，具体地，本发明涉及一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法。所述方法包括以下步骤：1)破碎藻细胞；2)使用甲醇粗提；3)液液萃取；4)C18固相萃取；5)Sephadex LH-20凝胶层析，收集MCLR活性峰；以及6)DEAE离子交换层析，收集MCLR活性峰，制得MCLR纯品。本发明提供的方法优点在于该法具有简便有效、经济实用、在一般实验条件下即可实现并且相对稳定的特点，能够制备毫克级MCLR纯品，经HPLC分析，其纯度达85％以上。

主权项

一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)破碎藻细胞；2)向破碎的藻细胞中加入甲醇，使甲醇的终浓度为40～100％，进行藻毒素的振荡提取，收集提取后的上清液，蒸发去除甲醇；3)对步骤2)得到的溶液进行液液萃取，抽取水相，得到MCLR水溶液；4)对步骤3)得到的MCLR水溶液进行C18固相萃取，用0～20％的甲醇洗脱杂质，最后用50～100％甲醇洗脱MCLR，将得到的MCLR洗脱液蒸发至干，并用100％甲醇溶解，得到MCLR甲醇溶液；5)将步骤4)得到的MCLR甲醇溶液上样至Sephadex LH-20凝胶层析柱，进行层析分离，收集MCLR活性峰，浓缩蒸干后溶于超纯水中，得到MCLR水溶液；以及6)将步骤5)得到的MCLR水溶液上样至DEAE离子交换层析柱，收集MCLR活性峰，制得MCLR纯品。