[发明专利]一种细菌阿魏酸脱羧酶基因及其晶体结构无效
| 申请号： | 200810233517.X | 申请日： | 2008-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN101397568A | 公开（公告）日： | 2009-04-01 |
| 发明（设计）人： | 张克勤;饶子和;孟照辉;娄智勇;杨金奎;顾雯 | 申请（专利权）人： | 云南大学 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N15/70;C12N9/88 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 | 代理人： | 杨宏珍 |
| 地址： | 650091云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及阿魏酸脱羧酶的表达、纯化、结晶方法、结构解析和应用技术领域，属于分子生物学和应用微生物学领域。本发明通过基因克隆的方法获得Enterobacter sp.Px6-4中分解阿魏酸生成4-乙烯基愈创木酚的关键酶阿魏酸脱羧酶的编码区序列、并通过异源表达技术在大肠杆菌(E.coli BL21)中大量表达了该酶；通过纯化的方法获得了阿魏酸脱羧酶的纯品；运用悬滴结晶法得到阿魏酸脱羧酶的蛋白质结晶，并且掌握了该酶的结构及活性中心。本发明能获得大量的高活性阿魏酸脱羧酶，并且通过对该酶活性中心的分析为改造工程菌以及提高4-乙烯基愈创木酚产量提供理论上的指导，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 阿魏酸 脱羧酶 基因 及其 晶体结构 | ||
【主权项】：
1、一种细菌阿魏酸脱羧酶基因，其特征在于阿魏酸脱羧酶编码基因的核苷酸序列如下：aattaatcta aaatttggat gaatttgatt caaacatagc gttattcatt cgttttttga 60aggaataaga tcgtctcatc aaaacaaagg agacatctta tgaacacctt cgacaaacat 120gatttaagcg gcttcgtcgg caaacatctg gtttatacct acgataacgg ctgggaatat 180gaaatttacg tcaaaaacga aaacaccctc gactaccgta ttcacagcgg cctggtcggc 240aaccgctggg tgaaagacca gcaggcgtac atcgtccgcg ttggggagag catctataaa 300atctcctgga ccgagcccac cggcaccgac gtgagcctga ttgtgaacct gggtgacagc 360ctgttccacg gcacgatctt cttcccgcgc tgggtaatga acaatccgga aaaaaccgtc 420tgcttccaga acgatcacat tccgttgatg aatagctatc gcgatgcggg cccggcatat 480ccaaccgaag tgattgatga atttgccact attacttttg ttcgcgactg cggtgccaac 540aatgaaagcg ttatcgcgtg cgctgccagt gaacttccaa aaaactttcc tgataattta 600aaataagcgc gacaattaac taaaaagaaa agttcccggc ccatttcata tttattcgaa 660atggtcggga atttttttgt ttgttgatgt ttggtttaga taaaaagcgc gttaacggtg 720agcgtaatca caaaacaaat aattcataat ttaataacgc tttgattatt aattggtttt 780
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