[发明专利]迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂中的应用无效
| 申请号： | 200810237783.X | 申请日： | 2008-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN101423827A | 公开（公告）日： | 2009-05-06 |
| 发明（设计）人： | 邵楠;李荣贵 | 申请（专利权）人： | 邵楠;青岛大学 |
| 主分类号： | C12N9/82 | 分类号： | C12N9/82;C12R1/19 |
| 代理公司： | 青岛高晓专利事务所 | 代理人： | 隋臻玮 |
| 地址： | 266071山东省青岛市市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂中的应用，属于生物医药领域。首先从大肠杆菌中制备L-天冬酰胺酶提取液，然后在L-天冬酰胺酶活性测定体系中分别加入不同浓度的迷迭香酸和L-天冬酰胺，测定每个反应体系的反应速度，计算每个迷迭香酸浓度下的米氏常数，判断其对L-天冬酰胺酶的激活作用。迷迭香酸在浓度为0.375×10-4～3.0×10-4g/ml范围内能显著提高L-天冬酰胺酶催化L-天冬酰胺的降解活性。本发明可以降低临床上在肿瘤治疗过程中的L-天冬酰胺酶的用量，降低因其免疫原性而带来的副作用，或者据此设计针对细菌L-天冬酰胺酶的靶位点的迷迭香酸衍生物作为新的抗菌药物。 | ||
| 搜索关键词： | 迷迭香酸 大肠杆菌 天冬 酰胺酶 激活剂 中的 应用 | ||
【主权项】：
1、迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂中的应用，其特征在于首先从大肠杆菌制备L-天冬酰胺酶提取液；在L-天冬酰胺酶活性测定体系中分别加入TE缓冲液以及不同浓度的迷迭香酸和L-天冬酰胺，45℃水浴加热，用20％三氯乙酸终止反应；反应体系离心后加AB-8大孔树脂悬浮液，充分振荡后离心以去除溶液中的迷迭香酸，分别取上清于蒸馏水中，加Nessler试剂，振荡使之充分混匀后于395nm处测定吸光度，测定酶促反应速度；计算每个迷迭香酸浓度下的米氏常数，迷迭香酸浓度为0.375×10-4～3.0×10-4g/ml时可显著提高体系中L-天冬酰胺酶活性，降低大肠杆菌L-天冬酰胺酶催化L-天冬酰胺分解反应的Km值，提高反应速度。
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