[发明专利]皮下转移的脏器癌荧光原位移植模型建立的方法无效
申请号: | 200810242611.1 | 申请日: | 2008-12-29 |
公开(公告)号: | CN101502444A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
发明(设计)人: | 金黑鹰;杨志坚 | 申请(专利权)人: | 南京源端生物科技有限公司 |
主分类号: | A61B19/00 | 分类号: | A61B19/00;G01N21/64 |
代理公司: | 南京天翼专利代理有限责任公司 | 代理人: | 汤志武;王鹏翔 |
地址: | 210009江苏省南京市鼓楼区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 皮下转移的脏器癌荧光原位移植模型建立的方法,选用人结肠腺癌细胞株或相应脏器的癌细胞株绿色荧光蛋白,绿色荧光蛋白GFP质粒通过逆转录病毒pLPCX对脏器的癌细胞株进行转染:使脏器的癌细胞株含有GFP的表达质粒,.GFP基因通过T4连接酶与pLPCX载体连接,GFP-pLPCX载体被转染至PT67包装细胞,得到Lovo细胞;选用裸鼠并在其皮下接种Lovo细胞悬液,约4周成瘤,观察到绿色荧光后开始进行原位移植;将皮肤及腹膜剪一小口,将裸鼠肓肠提出腹膜外约1cm,缝合盲肠与腹膜间隙,将盲肠转移至皮下;让切开盲肠浆膜,缝线2块直径约为1mm的携带荧光的肿瘤移植在盲肠处,关闭皮肤。 | ||
搜索关键词: | 皮下 转移 脏器 荧光 原位 移植 模型 建立 方法 | ||
【主权项】:
1、皮下转移的脏器癌荧光原位移植模型建立的方法,其特征是:选用人结肠腺癌细胞株或相应脏器的癌细胞株绿色荧光蛋白,绿色荧光蛋白GFP质粒通过逆转录病毒pLPCX对脏器的癌细胞株进行转染:使脏器的癌细胞株含有GFP的表达质粒,.GFP基因通过T4连接酶与pLPCX载体连接,GFP-pLPCX载体被转染至PT67包装细胞,得到Lovo细胞;选用裸鼠并在其皮下接种Lovo细胞悬液注入皮下,注射完毕后,对注射部位进行观察,约4周成瘤,肿瘤生长至5mm,观察到绿色荧光后开始进行原位移植;裸鼠腹腔注射麻醉,左腹部碘酊消毒,将皮肽及腹膜剪一小口,将裸鼠肓肠提出腹膜外约1cm,缝合盲肠与腹膜间隙,将盲肠转移至皮下;让切开盲肠浆膜,缝线2块直径约为1mm的携带荧光的肿瘤移植在盲肠处,关闭皮肤。
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