[发明专利]检测和分离生物流体样品中血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)同种型的方法和由此获得的酶同种型无效
| 申请号： | 200880021630.X | 申请日： | 2008-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN101730747A | 公开（公告）日： | 2010-06-09 |
| 发明（设计）人： | A·保利基;A·蓬佩拉;M·弗兰奇尼;R·巴尔萨奇;M·埃姆金;E·布拉马尼 | 申请（专利权）人： | 比萨大学 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 赵蓉民;陆惠中 |
| 地址： | 意大利*** | 国省代码： | 意大利;IT |
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| 摘要： | 描述了检测生物流体如血浆或血清的样品中γ-谷氨酰转移酶同种型(GGT，EC2.3.2.2)的方法。所述方法包括基于分子大小的样品蛋白质的HPLC分离步骤和第二步骤，所述第二步骤用于通过与能够产生可检测终产物的GGT酶底物进行柱后反应，优选地通过分光光度或荧光方法来检测GGT同种型。GGT同种型可以通过超离心进行分离，从而获得三种酶同种型，它们分别以大约2000、940和140KDa的分子量表征。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 分离 生物 流体 样品 血清 谷氨酰 转移酶 ggt 同种 方法 由此 获得 | ||
【主权项】：
一种检测生物流体样品中的血清γ-谷氨酰转移酶(sGGT)同种型的方法，其包括下述步骤：(a)借助于适合基于分子量分离血清蛋白的HPLC柱，通过高效液相色谱(HPLC)分离存在于所述样品中的血清蛋白，以实现将血清蛋白分离成不同的馏分并且随后将分别与每一馏分结合的不同血清γ-谷氨酰转移酶(sGGT)同种型分离；(b)使在前面步骤中获得的每一蛋白质馏分与γ-谷氨酰转移酶(sGGT)底物进行柱后反应，所述γ-谷氨酰转移酶底物能够在这样的蛋白质馏分中在GGT的存在下形成可检测的产物；(c)测定在每一蛋白质馏分中可检测产物的存在或不存在，在给定蛋白质馏分中可检测产物的存在表示在所述蛋白质馏分中结合的GGT同种型的存在。
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