[发明专利]琥珀酰二胺的制备方法及其抗菌活性的用途

摘要

本发明公开了一种SCD的制备方法及其抗菌活性的用途，内容包括：(1)制备：以一株不动杆菌属的细菌菌株进行发酵生产。(2)分离提取：发酵液离心、减压浓缩、有机溶剂萃取、过硅胶层析柱、最后用丙酮重结晶，得到SCD纯品。(3)结构解析：经紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱及质谱确定结构为SCD，结构如式2。(4)抑菌实验：对大肠杆菌等几种细菌具有抑制作用。(5)经对人脐带静脉内皮细胞增殖作用的影响实验表明，SCD对人体细胞没有明显的毒性作用。本发明中SCD具有新的结构、是个小分子化合物，容易透过组织和细胞，既可进行抗菌机制研究，又有开发成新型抗菌药物的潜力。

主权项

1、琥珀酰二胺(Succinamide conjugate diacid，SCD，化学结构如式1所示)，其特征在于其制备方法如下：式1：琥珀酰二胺化学结构式1-1、以PDA为基础培养基，发酵制备琥珀酰二胺：a)菌种活化：从-20℃保藏的菌种中取少量菌种接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，于15℃进行震荡培养(200rpm)48h进行活化，将菌悬液浓度调整为10⁶～10⁷cell/mL。b)发酵条件：发酵培养基为PDA液体培养基，1％(v/v)接种量，15～20℃，pH6.5～7.5，通空气量0.5～1.0vvm，发酵3～5天。1-2、琥珀酰二胺分离纯化：将发酵液于4℃进行离心(15min，8000rpm)，收集上清液，并将上清进行减压浓缩；将浓缩后的上清液用EtOAc(乙酸乙酯)和n-BuOH(正丁醇)进行萃取；将萃取产物回收，过硅胶层析柱，洗脱液为丙酮在石油醚中的浓度梯度(0～50％)，50mL为一流分；将流分蒸发致干，点到硅胶板上，用石油醚：乙酸乙酯(3:1)进行展开，把相同的Rf值(极性越小，Rf值越大)的样品合并在一起，最后用丙酮重结晶，得到式1所示的琥珀酰二胺纯品。