[发明专利]具有高产α-环糊精能力的环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及突变方法无效
| 申请号： | 200910029154.2 | 申请日： | 2009-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN101503681A | 公开（公告）日： | 2009-08-12 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;陈坚;李兆丰;张佳瑜 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/70;C12P19/34;C12R1/01 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122江苏省无锡市蠡湖大道*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 具有高产α-环糊精能力的环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及突变方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明改进环糊精葡萄糖基转移酶(简称CGT酶)的产物特异性，提供了提高来源于Peanibacillus macerans JFB 05-01(CCTCC NO：M 208063)的CGT酶产α-环糊精能力的突变方案，将CGT酶的372位的Asp替换为Lys，89位的Tyr分别替换为Asp及Arg，分别获得单突变体酶D372K，Y89D及Y89R，它们的α-环糊精生产能力较野生型CGT酶有所提高；将带有Lys372的CGT酶的基因片段替代Y89R基因的相应片段，可获得双突变体酶D372K/Y89R，其α-环糊精产量比野生型CGT酶增加了1.5倍，而β-环糊精产量降低了57％。这些突变体比野生型CGT酶更利于α-环糊精的生产。 | ||
| 搜索关键词： | 具有 高产 环糊精 能力 葡萄 糖基转移酶 突变体 突变 方法 | ||
【主权项】：
1、来源于软化类芽孢杆菌(Peanibacillus macerans)JFB05-01的环糊精葡萄糖基转移酶，简称CGT酶，的三种单突变体酶D372K，Y89D及Y89R，其特征是：将CGT酶基因中第372位的天冬氨酸Asp突变成了赖氨酸Lys，命名为D372K；将CGT酶基因中第89位的酪氨酸Tyr分别突变成了天冬氨酸Asp或精氨酸Arg，分别命名为Y89D及Y89R；它们相比于野生型CGT酶具有更高的产α-环糊精能力。
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