[发明专利]一种乙二醛、乙醛酸的高效液相色谱分析法

摘要

本发明涉及一种乙二醛、乙醛酸的高效液相色谱分析法。具体的检测步骤为：取适量试样，加入与醛基摩尔比为2∶1～50∶1的DNPH作衍生试剂，用弱酸盐溶液调节pH为1.5～3后，于30～80℃恒温水浴中，反应60～240分钟，得到的衍生物用HPLC分析，紫外检测波长为400-500nm。HPLC分析条件为：流动相为体积比为95/5～50/50的乙腈/水溶液，流速为0.6～2ml/min，柱温为20～50℃，进样量为1～20μL。本发明乙二醛、乙醛酸的高效液相色谱检测法，具有自动化程度高、选择性高、检测灵敏、高效准确等优势。实验结果表明，乙醛、乙酸和草酸对乙二醛和乙醛酸检测不会产生相互干扰。

主权项

1、一种乙二醛、乙醛酸的高效液相色谱分析法，其具体步骤如下：A、乙二醛标准曲线的绘制1)、乙二醛标准溶液的配制：用移液管移取适量乙二醛溶液，用去离子水稀释，并定容，配制5～7个浓度介于0.001g/L与0.05g/L之间的乙二醛标准溶液；2)、衍生试剂的配制：用乙腈溶解2，4-二硝基苯肼简称为DNPH试剂，配制得0.1～2g/LDNPH溶液；3)、乙二醛衍生试样的制取：分别取相同体积、不同浓度的上述步骤1)中乙二醛标准溶液，分别加入相同体积的步骤A中2)配制的DNPH溶液，其中DNPH与最高浓度乙二醛标准溶液中醛基的摩尔比为2∶1～50∶1，用弱酸调节pH为1.5～3后，于30～80℃恒温水浴中，反应60～240分钟得到所需的目标产物；4)、配制pH为2～5的去离子水，与色谱纯乙腈一起作为液谱分析流动相；5)、用高效液相色谱分析上述步骤3)所配制的不同浓度的乙二醛衍生试样，采用紫外吸收检测器，色谱分析条件为：色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18，5μm，4.6×250mm；流动相：乙腈与水的体积比为95/5～50/50；流速：0. 6～2ml/min；柱温：20～50℃；进样量：1～20μL；检测波长：400～500nm。6)、以不同浓度的乙二醛衍生物的响应峰面积对浓度作图，得到乙二醛的标准曲线；B、乙醛酸标准工作曲线的绘制1)、乙醛酸标准溶液的配制方法：分别称取不同质量的乙醛酸试样，用去离子水溶解，并定容，配制5～7个浓度为0.005g/L～0.2g/L之间的乙醛酸标准溶液；2)、配制与步骤A中2)浓度相同的DNPH溶液；3)、乙醛酸衍生试样的制取：取与步骤A中3)的乙二醛标准溶液体积相同的、步骤B中1)配制的不同浓度的乙醛酸标准溶液，加入与步骤A中3)相同体积的DNPH溶液，用弱酸盐溶液调节pH为1.5～3后，于30～80℃恒温水浴中，反应60～240分钟得到目标衍生物；4)、采用与A中4)-6)同样的步骤绘制乙醛酸的标准曲线；C、未知浓度样品的衍生和检测1)、配制与步骤A中2)浓度相同的DNPH溶液；2)、取与步骤A中3)的乙二醛标准溶液体积相同、含有未知浓度乙二醛和乙醛酸的混合溶液，加入与步骤A中3)相同体积的DNPH溶液，用弱酸盐溶液调节pH为1.5～3后，于30～80℃恒温水浴中，反应60～240分钟得到衍生样品；3)、采用与A中4)-5)相同的步骤对衍生样品进行高效液相色谱分析；D、将衍生试样的检测结果分别与乙二醛标准曲线和乙醛酸标准曲线进行比照，求得样品溶液中乙二醛和乙醛酸的含量。