[发明专利]肺炎支原体快速检测试剂盒及使用方法有效
| 申请号： | 200910039674.1 | 申请日： | 2009-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN101665827A | 公开（公告）日： | 2010-03-10 |
| 发明（设计）人： | 孙宜峰;曾冰冰;胡荣;刘义江 | 申请（专利权）人： | 珠海市银科医学工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/78;C12R1/35 |
| 代理公司： | 广州市红荔专利代理有限公司 | 代理人： | 王贤义 |
| 地址： | 519090广东省珠*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种肺炎支原体快速检测试剂盒及使用方法。其中试剂盒内包括环介导恒温扩增反应管、BstDNA聚合酶；反应管中含有反应缓冲液、dNTP、硫酸镁、引物1：5-ACCAATGCCATCAACCCG-3、引物2：5-TACCGGCGTAACGCAAAG-3、引物3：5-ATTTTCACCCGTGAGGGGGAGTTTTCGCTTAACCCCGTGAACG-3、引物4：5-ACAGCGCTAAGGGCATCACTGTTTTTCAAAGCCGCTTCGGTTC-3、甜菜碱、氯化锰和钙黄绿素。检测肺炎支原体的方法包括待测样品或细菌DNA的提取、肺炎支原体的环介导恒温扩增反应和显色检测。本发明具有检测准确、灵敏度高、特异性强、简便、快速的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 肺炎 支原体 快速 检测 试剂盒 使用方法 | ||
【主权项】：
1、一种肺炎支原体快速检测试剂盒，其特征在于，其中的试剂包括：(1)环介导恒温反应管：包括10×ThermoPol反应缓冲液、5-10pmol的引物1、5-10pmol的引物2、20-40pmol的引物3、20-40pmol的引物4、1.4-1.6mmol/L的dNTP、4-6mmol/L的硫酸镁、0.8-1.2mol/L的甜菜碱、0.4-0.5mmol/L的氯化锰和25-50μmol/L的钙黄绿素；其中，10×ThermoPol反应缓冲液含有200mM pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mM的氯化钾、100mM的硫酸铵、20mM的硫酸镁和1％的曲拉通X-100；其中所述dNTP中含有的dATP、dTTP、dCTP、dGTP的质量比为1∶1∶1∶1其中所述引物1为：5-accctcgggggcagtcag-3；所述引物2为：5-ctgattgtccctgctggtcc-3；所述引物3为：5-gttcagagctggaggttggctttttcgatgattacaggcggttc-3；所述引物4为：5-gggcggggtgaaggaatgatattttctcgtgaacttggtgtggt-3；(2)Bst DNA聚合酶：8U/μL。
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