[发明专利]一种分离基因重组蛋白的亲和-膜过滤载体的制法与应用

摘要

本发明涉及涉及一种分离基因重组蛋白的亲和-膜过滤载体的制法与应用。在超声场中对碱活化的水溶性载体基质进行环氧活化后，与亲和配基偶联，再与金属离子螯合，获得水溶性亲和-膜过滤载体。采用本发明制备水溶性亲和-膜过滤载体时载体的环氧活化取代度最高可达1.5374mmol/g，金属离子和组氨酸标记间的螯合作用能力强，提高了亲和-膜过滤载体材料对基因重组蛋白的特异性吸附，具有很高的选择性，采用本发明方法分离带组氨酸标记的基因重组蛋白的回收率达90％以上。

主权项

1、一种分离基因重组蛋白的亲和-膜过滤载体的制法，其特征在于，包括以下步骤：(1)水溶性载体基质的碱活化：将水溶性载体基质溶解于碱溶液中，形成混合溶液，其中，水溶性载体基质的重量百分数的2～6％，反应后得到碱活化载体；(2)碱活化载体的环氧活化：向碱活化载体中加入环氧氯丙烷，组成反应体系，将反应体系在超声场中反应2～5h，反应温度为30℃～50℃，得环氧活化载体；(3)环氧活化载体与亲和配基的偶联：将亲和配体与环氧活化载体溶液以体积比1∶1～3∶1进行反应，反应温度为30℃～50℃，反应时间为2～5h，得偶联亚氨基二乙酸的载体；(4)偶联亲和配基的载体与金属离子的耦合：将金属离子溶液与偶联亚氨基二乙酸的载体溶液以体积比1∶1～3∶1进行反应，反应温度为20℃～40℃，反应时间为2～4h，得到本发明的亲和-膜过滤载体。