[发明专利]一种新西伯利亚银白杨的微繁方法无效
申请号: | 200910071346.X | 申请日: | 2009-01-24 |
公开(公告)号: | CN101502238A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
发明(设计)人: | 杨玲;沈海龙 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学;沈海龙;杨玲 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;C12N5/04 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 | 代理人: | 金永焕 |
地址: | 150040黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种新西伯利亚银白杨的微繁方法,它涉及一种微繁方法。它解决了新西伯利亚银白杨繁殖周期长、增殖效率低和成本高的问题。方法:1.外植体的消毒;2.将外植体切割成茎段,然后诱导培养;3.将外植体同连增生的无菌芽一起转接于继代培养基中,继代培养为微枝;4.将每个微枝从茎段上单独切离,然后进行增壮培养;5.将增壮后的微枝切割成茎段,然后进行增殖培养,再扦插于生根基质中进行生根培养后即完成新西伯利亚银白杨的微繁。本发明中新西伯利亚银白杨的微繁,繁殖周期短,效率高,遗传稳定性好,其增殖效率可达30倍,成本低,且生根率和移苗成活率均可达100%。 | ||
搜索关键词: | 一种 西伯利亚 银白 方法 | ||
【主权项】:
1、一种新西伯利亚银白杨的微繁方法,其特征在于新西伯利亚银白杨的微繁方法按以下步骤实现:一、将清洗后的新西伯利亚银白杨外植体在超净工作台上用质量浓度为75%的乙醇溶液浸泡60s后再用另一份质量浓度为75%的乙醇溶液浸泡60s,然后用无菌水冲洗3~5次,再用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液消毒12~15min,然后用无菌水冲洗3~5次;二、将消毒后的外植体切割成带有1个顶芽或1~2个腋芽、且长度为1~2cm的茎段,然后接种于诱导培养基中,在温度为25~28℃、湿度为70%~80%、光照强度为40~60μmol·cm-2·s-1、每天光照16~18h的条件下培养至无菌芽生长长度为0.5~1cm;三、将外植体连同增生的无菌芽一起转接于继代培养基中,在温度为25~28℃、湿度为70%~80%、光照强度为40~60μmol·cm-2·s-1、每天光照16~18h的条件下培养至无菌芽生长长度为2~5cm,即为微枝;四、将每个微枝从茎段上单独切离,然后接种于增壮培养基中,在温度为25~28℃、湿度为70%~80%、光照强度为40~60μmol·cm-2·s-1、每天光照16~18h的条件下培养至微枝生长长度为4~6cm;五、将增壮后的微枝切割成带有1个顶芽或1~2个腋芽、且长度为1~2cm的茎段,然后逐段接种于增殖培养基中培养至微枝生长长度为4~6cm,再扦插于生根基质中进行生根培养后即完成新西伯利亚银白杨的微繁;其中步骤二中诱导培养基是以改良MS固体培养基为基本培养基,且还包含0.5~1.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤、0.05~0.1mg/L的奈乙酸和质量浓度为2.5~3.0%的蔗糖,pH值为5.6~6.0;步骤三中继代培养基是以改良MS固培养基为基本培养基,且还包含0.1~0.3mg/L的6-苄基氨基嘌呤、0.05~0.1mg/L的奈乙酸和质量浓度为2.0~2.5%的蔗糖,pH值为5.6~6.0;步骤四中增壮培养基是以MS固培养基为基本培养基,且还包含质量浓度为2.0~2.5%的蔗糖,pH值为5.6~6.0;步骤五中增殖培养基是以改良MS固培养基为基本培养基,且还包含0.1~0.3mg/L的6-苄基氨基嘌呤、0.05~0.1mg/L的奈乙酸和质量浓度为2.0~2.5%的蔗糖,pH值为5.6~6.0;步骤五中生根基质按体积比由25%的草炭土、30%的蛭石和45%的珍珠岩组成,生根基质含水量为50%~60%。
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