[发明专利]人工合成猪生长激素基因及其表达纯化方法无效
| 申请号： | 200910075520.8 | 申请日： | 2009-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN101665788A | 公开（公告）日： | 2010-03-10 |
| 发明（设计）人： | 柴宝峰;梁爱华;张振兴;王伟;付月君;申泉;张志云 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12N15/18 | 分类号： | C12N15/18;C12N15/70;C12P21/02;C07K14/61;C07K1/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所（有限公司） | 代理人： | 杨耀田 |
| 地址： | 030006山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明涉及人工合成猪生长激素基因及其表达纯化方法，本发明依据大肠杆菌偏爱密码子使用原则，设计了适合在大肠杆菌中高效表达的猪生长激素PGH的DNA序列，其表达的PGH蛋白与猪体内表达的PGH编码区氨基酸序列一致。将该基因克隆到pET-28a+表达系统中，转化大肠杆菌BL21(DE3)。0.5mmol/L IPTG，37℃诱导表达6小时的条件下，电泳检测到该基因的表达产物占全菌蛋白的70％以上，产物以包涵体的形式存在，适合规模化工业生产的需要。包涵体用低浓度尿素(2M)和高pH(12)缓冲液溶解，通过降低pH值至8.5，进行复性，复性率达到30％以上。进一步凝胶层析进行纯化，得到纯度达98％以上的PGH蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 人工合成 生长激素 基因 及其 表达 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1、一种人工合成的猪生长激素PGH基因，其特征在于，它是序列表中SEQ ID NO1的核苷酸序列。
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