[发明专利]一种乙肝病毒双表达质粒及构建方法和应用

摘要

本发明涉及一种乙肝病毒双表达质粒及其构建方法，首先分别以乙肝病毒前C-C基因/自身复制调控元件增强子II、乙肝病毒前S-S基因/自身复制调控元件增强子I为目的基因，使用真核表达载体VR012，构建乙肝ENH II/前C-C基因疫苗重组质粒VEC和ENH I/前S-S基因疫苗重组质粒VES；然后采用单引物二次PCR法，突变VES重组质粒，在表达调控单元下游插入酶切位点；最后利用插入的酶切位点，PCR扩增VEC重组质粒的调控和表达单元，酶切重组到突变后的VES质粒中，得到2个启动子分别调控表达乙肝病毒前C-C基因和前S-S基因的双表达质粒做为DNA疫苗。该重组HBV DNA疫苗能有效地表达乙肝表面抗原和核心抗原，可用于乙型肝炎的预防和治疗。

主权项

一种乙肝病毒双表达质粒，其特征在于，其包括真核细胞表达载体VR1012上插入核苷酸序列的乙肝病毒前C-C基因和自身复制调控元件增强子II以及含调控序列的乙肝病毒前S-S基因和自身复制调控元件增强子I。