[发明专利]一种HIV-1融合抑制剂体外筛选方法

摘要

本发明公开了一种HIV-1融合抑制剂体外筛选方法，属生物技术领域。该方法是用可吸附组氨酸标签的磁珠对带有组氨酸标签的HIV-1 gp41五螺旋蛋白粗提物于微孔板上进行包被，微孔板设阴性对照3孔，每孔分别加入2μl二甲亚砜，设阳性对照3孔，包被时不加五螺旋蛋白粗提物，其他孔中每孔分别加入2μl不同浓度的待测化合物样品，之后所有孔均分别加入98μl报告基团标记C-螺旋溶液，在15-40℃下孵育10分钟，甩去孔内液体，洗板后用荧光分析仪检测报告基团信号，计算待测样品的抑制率。本发明方法步骤简单、快速便捷且成本低廉。

主权项

1、一种HIV-1融合抑制剂体外筛选方法，其特征在于包括以下步骤：(1)HIV-1gp41五螺旋蛋白的包被将可吸附组氨酸标签的磁珠与带有组氨酸标签的HIV-1gp41五螺旋蛋白粗提物于微孔板上在20-40℃下孵育10-20分钟，于磁板上沉淀后甩去孔中液体，洗板后待用；(2)待测化合物样品的制备室温下将待测化合物样品用二甲亚砜配制成不同浓度的溶液，充分振荡溶解后备用；(3)待测化合物样品的筛选微孔板设阴性对照3孔，每孔分别加入2μl二甲亚砜，设阳性对照3孔，包被时不加五螺旋蛋白粗提物，其他孔中每孔分别加入2μl不同浓度的待测化合物样品，之后所有孔均分别加入98μl报告基团标记C-螺旋溶液，振荡器充分混匀后，在15-40℃下孵育10分钟，甩去孔内液体，洗板后用荧光分析仪检测报告基团信号，计算待测样品的抑制率。