[发明专利]一种鼠骨髓瘤细胞NSO及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种鼠骨髓瘤细胞NSO及其制备方法与应用。该鼠骨髓瘤细胞NSO是一种能在无血清、无脂类培养基中生长的鼠骨髓瘤细胞NSO，其中一株(NSO-Ch1)保藏号为CGMCC No.2127。用本发明的能在无血清、无脂类培养基中生长的鼠骨髓瘤细胞NSO表达外源蛋白，既能保证细胞培养效率和表达效率，又可避免带来其它动物来源成分及不安全因素，进而可以有效降低纯化成本和损失，提高生物制品成品率和利润率。

主权项

1、一种在无血清无脂类培养基中生长的鼠骨髓瘤细胞NSO，是按照包括如下步骤的方法得到的：(1)将鼠骨髓瘤细胞NSO接种于含血清的细胞培养基中进行原代培养；(2)将步骤(1)得到的鼠骨髓瘤细胞NSO进行传代培养，传代培养过程中每代所用的细胞培养基中血清浓度均在前一代培养中所用细胞培养基中血清浓度的基础上进行稀释；(3)当传代培养至所用的培养基中血清浓度为0.2-0.3％(体积百分含量)时，用5-氮胞苷处理传代培养后的鼠骨髓瘤细胞NSO；(4)将步骤(3)处理后的鼠骨髓瘤细胞NSO接种至无血清、含有牛血清白蛋白的细胞培养基中培养；(5)将步骤(4)获得的细胞接种至无血清且不含牛血清白蛋白的细胞培养基中培养；得到在无血清无脂类培养基中生长的鼠骨髓瘤细胞NSO。