[发明专利]提取纯化DNA的试剂有效
申请号: | 200910090335.6 | 申请日: | 2009-08-05 |
公开(公告)号: | CN101613696A | 公开(公告)日: | 2009-12-30 |
发明(设计)人: | 赵兴春;叶健;姜伯玮 | 申请(专利权)人: | 公安部物证鉴定中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/04 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关 畅;任凤华 |
地址: | 100038北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种提取纯化DNA的试剂。该试剂由以下物质组成:预处理裂解液:pH为7.4-8.5,溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:10-100mM缓冲盐,0.5%-5%表面活性剂,1-100mM螯合剂和50-150mM可溶性盐,0.2-4mg/ml蛋白酶K;裂解结合液:pH=6.4-7.4,溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:20-150mM缓冲盐,3-8MChaotropic盐,1-10%表面活性剂,0.5-4%兼性离子去污剂,10-100mM螯合剂以及15-30%醇;洗涤液I:溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:4-6MChaotropic盐,25-50%醇和10-100mM螯合剂;洗涤液II为75%乙醇水溶液;洗脱液为TE(10mM Tris-HCl,1mMEDTA,pH为8.0);磁珠悬浮液为纳米级硅包被磁性微球(50-100mg/ml)。采用该试剂提取DNA效率高达93.67%。 | ||
搜索关键词: | 提取 纯化 dna 试剂 | ||
【主权项】:
1、一种提取纯化DNA的试剂,由以下物质组成:预处理裂解液:pH为7.4-8.5,溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:10-100mM缓冲盐,0.5-5g/100ml的表面活性剂,1-100mM的螯合剂,50-150mM的可溶性盐和0.2-4mg/ml的蛋白酶K;裂解结合液:pH=6.4-7.4,溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:20-150mM的缓冲盐,3-8M的Chaotropic盐,1-10%(体积百分比)的表面活性剂,0.5-4g/100ml的兼性离子去污剂,10-100mM的螯合剂以及15-30%(体积百分含量)的醇;洗涤液I:溶剂是水,溶质是如下终浓度的物质:4-6M的Chaotropic盐,25-50%(体积百分含量)的醇和10-100mM的螯合剂;洗涤液II:75-80%(体积百分含量)乙醇水溶液;洗脱液:是TE溶液,所述TE溶液的pH为8.0,溶剂是水,溶质是0-20mM的Tris-HCl,0-2mM的EDTA;磁珠悬浮液:每ml磁珠悬浮液的成分如下:直径为50-1200nm的纳米级硅包被磁性微球50-100mg,其余为水。
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