[发明专利]一种可携带糖皮质激素作为炎症靶向药物新制剂的合成方法

摘要

本发明公开了一种可携带糖皮质激素作为炎症靶向药物新制剂的合成方法，该方法以水溶性N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物作为携带糖皮质激素的载体，通过下述五个步骤，合成N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物与泼尼松龙接合的炎症靶向制剂：(1)合成高分子N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物；(2)合成短肽链；(3)合成聚合物-肽链共聚物；(4)合成聚合物先导分子；(5)合成聚合物-肽链-泼尼松龙。本发明合成的新型的靶向制剂，可以把泼尼松龙定向地运送到炎症组织，特别是关节炎的发炎组织中，在炎症组织中释放，发挥良好的抗炎作用，对正常组织不产生不良反应，是一个十分优良的新新型的炎症靶向制剂。

主权项

1、一种可携带糖皮质激素作为炎症靶向药物的新型制剂的合成方法，其特征是以N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物作为药物载体，通过下述五个步骤，合成N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物与泼尼松龙接合的炎症靶向制剂：(1)合成高分子N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物方法：将甲基丙烯酰氯100ml(1.01mol)加到含有1-氨基-2-丙醇160ml(2.02mol)的乙腈溶液中，室温搅拌30～40min，滤去沉淀，滤液在-50℃保温0.5～1h，直至沉淀完全析出，过滤，沉淀用丙酮重结晶；(2)合成短肽链方法：取甲基丙烯酰氯10ml(0.1mol)，缓慢滴加到甘氨酰苯丙氨酸Gly-Phe-OH的DMF溶剂中，保持温度在0℃搅拌反应8～10h，反应完毕减压蒸除溶剂得粗产物Ma-Gly-Phe-OH；取亮氨酸Leu(2. 0g，11mmol)溶解于20ml甲醇中，甲醇中预先溶解亚硫酰二氯(1.39g，11.7mmol)，保持温度在0℃搅拌反应4～6h，反应完毕减压蒸除溶剂得粗产物H-Leu-Gly-OMe.HCl；取H-Leu-Gly-OMe.HCl(254mg，1.07mmol)溶解于2mlN，N-二甲基甲酰胺，加入150mlTEA，混合物低温搅拌下，加入2mlDMF溶剂，在DMF中预先溶解Ma-Gly-Phe-OH(307mg，1.06mmol)，在反应液中加入1-羟基苯并三唑(175mg，1.15mmol)和DCCI(232mg，1.15mmol)，DCCI中预先溶解于4mlDMF中。保持反应温度在0℃搅拌1h，反应液置于冰箱中过夜，次日过滤，取滤液减压蒸馏除去DMF，残留物溶解于乙酸乙酯，依次用5％碳酸氢钠水溶液、柠檬酸水溶液和氯化钠水溶液萃取，保留有机相，用无水硫酸钠干燥脱水，然后蒸干，产物用乙酸乙酯-乙醚混合溶剂重结晶；将上述结晶产物溶解于50％甲醇水溶液中，加0.1M氢氧化钠水溶液调节到pH12，加热回流水解反应4h，蒸除溶剂甲醇，溶液加0.1M盐酸酸化到pH2，聚合短肽用乙酸乙酯萃取，有机相加硫酸钠干燥脱水，在乙酸乙酯-乙醚混合溶剂中重结晶即得产物Ma-Gly-Phe-Leu-Gly-OH；甲基丙烯酰四肽和4-硝基苯酚酯化制备甲基丙烯酰四肽硝酸酯。取Ma-Gly-Phe-Leu-Gly-OH溶解于THF中，缓慢滴加4-硝基苯酚THF溶液，保持室温搅拌反应24h，过滤，取滤液减压蒸除溶剂即得Ma-Gly-Phe-Leu-Gly-Onp；(3)合成聚合物-肽链共聚物方法：以2，2-偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂，HPMA与10％(mol/mol)MA-Gly-Phe-Leu-Gly通过自由基沉淀聚合反应(单体-AIBN-溶剂12：3：85，wt％)制备得到目标产物。具体操作是HPMA(812.5mg，6.9mmol)，MA-Gly-Phe-Leu-Gly-ONp(120mg，0.7mmol)溶解于7.2ml丙酮中，加入AIBN(8.6mg)作为引发剂，加入3-mercaptopropionic acid(11.2mg)作为链转移剂。混合物溶液转入安瓿中氮气鼓泡5min，排尽氧气，密封置于50℃恒温聚合反应24h，反应完毕后减压蒸除丙酮，固体残留物溶解于甲醇中，柱层析纯化，Sephadex LH-60柱层析，用甲醇洗脱，低分子量和高分子量聚合物弃去，收集分子量为MW10000的部分，收集液加压浓缩，产物投入无水乙醚中，析出沉淀即为终产物。产率60％，MW10000，分散度1.3；(4)合成聚合物先导分子取聚合物(3)(317mg，170μmol ONp)溶解于1.2ml DMSO中，保持室温搅拌下，逐滴加入过量水合肼(1700mg，34mmol)，水合肼预先溶解于4mlDMF中，继续搅拌30min，加水稀释到总体积50ml，透析，依次用20％乙醇水、稀盐酸(pH3)、水透析3d，聚合物冻干，产物用过量的羟基琥珀酰亚胺(HOSu)进一步活化，得到具有肼基的共聚物；(5)合成聚合物-肽链-泼尼松龙共聚物和过量的泼尼松龙(0.33g，0.92mmol)混合，混合采用NN-二甲基甲酰胺(1ml)作为溶剂，并滴加一滴醋酸作为催化剂。室温下搅拌反应过夜，柱层析LH-20分离2次除去未反应的低分子量化合物。收集收集分子量为MW10000的部分，收集液减压浓缩，冻干后得到最终产物P-泼尼松龙(P-Prs)。泼尼松龙产品的含量为50mg/g共聚物。