[发明专利]一种用于降解β淀粉样蛋白的细胞培养提取物及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种用于降解β淀粉样蛋白的细胞培养提取物及其制备方法、以及所述细胞培养提取物在制备治疗阿尔茨海默氏病的药物的应用。具体讲，所述细胞培养提取物既可以减少脑中淀粉样蛋白沉积和神经突触的丢失以及神经胶质细胞增生等神经毒性反应，又可以显著提高阿尔茨海默氏病模型动物的认知能力。

主权项

1.一种用于降解β淀粉样蛋白的细胞培养提取物的制备方法，该方法包括如下步骤：1)将哺乳动物的非阿尔茨海默氏病病变区的神经细胞以1×105细胞/cm2至1×108细胞/cm2的密度接种至第一培养基，培养18-30小时；2)将第一培养基全量换成新鲜的第二培养基；3)培养7-21天，培养期间进行每周两次半量培养基的更换，每次将其中一半的培养基换成新鲜的第二培养基；4)在最后一次培养基的半量更换后经过至少一天，将第二培养基全部更换成新鲜的第二培养基并继续培养24至48小时；5)在0-4℃下以1000至5000rpm转速离心1-30分钟，收集上清液；其中，所述非阿尔茨海默氏病病变区选自脑干、脑桥、基底节、皮质下白质、小脑、脊髓和延髓中的一种或多种，所述第一培养基和第二培养基不同，并且均为选自Neurobasal Medium、199细胞培养基、BME细胞培养基、MEM细胞培养基、DMEM细胞培养基、IMEM细胞培养基、RPMI-1640细胞培养基、Fischer’s细胞培养基、HamF10、F12细胞培养基、DMEM/F12细胞培养基、以及McCoy5A培养基中的一种。