[发明专利]提高骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力的培养方法

摘要

本发明提供了一种提高模拟微重力环境下骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力的培养方法，所述方法包括：将稳定传代的骨髓间充质干细胞接种至直径90～150μm的塑料微载体上，血清饥饿10～15小时后，用预处理培养液预处理1～3小时，然后在模拟微重力环境下用成骨诱导液进行诱导培养14～28天；本发明预处理培养液和成骨诱导液中添加20μmol/L去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷，并将调节预处理培养液和成骨诱导液中的BMP-2浓度提高到250ng/mL，有效地达到了在模拟微重力环境下增强骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力和降低向脂肪细胞分化能力的双重目的。

主权项

一种提高模拟微重力环境下骨髓间充质肝细胞向成骨细胞分化能力的培养方法，所述方法包括：将稳定传代的骨髓间充质干细胞接种至直径90～150μm的塑料微载体上，血清饥饿10～15小时后，用预处理培养液预处理1～3小时，然后在模拟微重力环境下用成骨诱导液进行诱导培养14～28天；所述预处理培养液终浓度组成如下：SB203580        1μmol/LBMP‑2           250ng/mLFGF2            20ng/mL5‑aza‑CdR       20μmol/L溶剂为DMEM培养液；所述成骨诱导培养液终浓度组成如下：SB203580            1μmol/LBMP‑2               250ng/mLFGF2                20ng/mL5‑aza‑CdR           20μmol/L胎牛血清            10％地塞米松            50nmol/mLβ‑磷酸甘油         10mmol/L2‑磷酸化抗坏血酸    50μmol/L溶剂为DMEM培养液。