[发明专利]一种利用内酯酶制备光学纯2-羟基-4-苯基丁酸的方法无效
| 申请号： | 200910198764.5 | 申请日： | 2009-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN101701227A | 公开（公告）日： | 2010-05-05 |
| 发明（设计）人： | 许建和;陈兵 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12P7/42 | 分类号： | C12P7/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 邬震中 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种化学-酶法制备光学纯2-羟基-4-苯基丁酸的新方法。该方法利用表达Fusarium proliferatum内酯酶基因的重组大肠杆菌细胞在优化条件下发酵产酶，然后以一锅煮的方式选择性催化水解4-苯基-2-羟基-4-丁内酯的非对映异构体，再将所需的构型在常温常压Pd/C催化氢化作用下，生成目标化合物。其中(R)- 2-羟基-4-苯基丁酸的对映体过量值达98％，摩尔转化率达36％，(S)-2-羟基-4-苯基丁酸的对映体过量值达99％以上，摩尔转化率达46％。本发明所述的生物催化剂及其化学-酶法工艺不仅具有较好的催化效果，而且操作简便、安全，成本低廉，产物容易纯化，对环境友好，具有工业开发应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 内酯 制备 光学 羟基 苯基 丁酸 方法 | ||
【主权项】：
一种利用内酯酶制备光学纯2-羟基-4-苯基丁酸的方法，其特征是包括如下步骤：1)采用Fusarium proliferatum内酯水解酶水解4-苯基-2-羟基-4-丁内酯(1)将保藏号为CGMCC 1494表达Fusarium proliferatum内酯水解酶基因的重组大肠杆菌JM109(DE3)或BL21(DE3)，在发酵培养基中进行扩增培养，离心洗涤得到静息细胞；(2)将(1)收获的静息细胞悬浮于pH为6.0～7.0的磷酸钾缓冲液中，加入4-苯基-2-羟基-4-丁内酯，在25～40℃反应0.5～8h，然后采用常规的分离方法从反应混合物中收集光学纯的(2S)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯、(2R)-4-苯基-2，4-二羟基丁酸和(2R)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯；2)将步骤1)所获得的光学纯的(2S)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯、光学纯的(2R)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯或光学纯的(2R)-4-苯基-2，4-二羟基丁酸用冰醋酸溶解，在常温常压和Pd/C催化的条件下氢化12h，得到(S)-2-羟基-4-苯基丁酸、(R)-2-羟基-4-苯基丁酸或(R)-2-羟基-4-苯基丁酸；所述的光学纯的(2S)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯、光学纯的(2R)-4-苯基-2-羟基-4-丁内酯或光学纯的(2R)-4-苯基-2，4-二羟基丁酸与Pd/C的重量比为10.01～0.05。
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