[发明专利]一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用有效
申请号: | 200910214350.7 | 申请日: | 2009-12-29 |
公开(公告)号: | CN101812494A | 公开(公告)日: | 2010-08-25 |
发明(设计)人: | 罗鹏;苏婷;任春华;胡超群 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12R1/63 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 510301 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种长PCR步移试剂盒及其使用方法和应用。本发明长PCR步移试剂盒包括:(1)试剂A:其中,每9.25~12.5μL试剂A中包含10mmol/L的dNTP1~3μL,25mmol/L MgCl23~4μL,10×PCR缓冲液5μL及LA Taq酶0.25~0.5μL;(2)试剂B:ddH2O5~20mL;(3)试剂C:琼脂糖5~20g;(4)试剂D:6×PCR上样缓冲液1~5mL;(5)试剂E:核酸染料20~100μL;(6)试剂F:50×电泳缓冲液10~20mL;(7)引物11条,序列如SEQ ID NO:1~11所示,每条各10~50μL。本发明长PCR步移试剂盒成本低,较之其它扩增方法明显简单、快速,效率高,一次即可获得长达3Kb以上的侧翼片段,用于获取DNA侧翼未知序列没有物种限制,可广泛用于分子生物学实验中。 | ||
搜索关键词: | 一种 pcr 试剂盒 及其 使用方法 应用 | ||
【主权项】:
一种长PCR步移试剂盒,其特征在于包括:(1)试剂A:其中,每9.25~12.5μL试剂A中包含10mmol/L的dNTP1~3μL,25mmol/LMgCl23~4μL,10×PCR缓冲液5μL及LA Taq酶0.25~0.5μL;(2)试剂B:ddH2O5~20mL;(3)试剂C:琼脂糖5~20g;(4)试剂D:6×PCR上样缓冲液1~5mL;(5)试剂E:核酸染料20~100μL;(6)试剂F:50×电泳缓冲液10~20mL;(7)引物11条,序列如SEQ ID NO:1~11所示,每条各10~50μL。
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