[发明专利]磁性微粒大量提取DNA的方法无效
申请号: | 200910254440.9 | 申请日: | 2009-12-22 |
公开(公告)号: | CN101748116A | 公开(公告)日: | 2010-06-23 |
发明(设计)人: | 崔亚丽;南婧;安德鲁·G·陈;周瑞民;李芳 | 申请(专利权)人: | 陕西北美基因股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 西安智邦专利商标代理有限公司 61211 | 代理人: | 徐平 |
地址: | 710069 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及纳微米材料的应用领域,具体涉及一种利用磁性微粒从生物样品中大量快速抽提基因组DNA的方法。该方法具体步骤是:(1)裂解生物样品:取一定量血液、组织等生物样品,加入蛋白酶K溶液和浓度为4~6M的盐酸胍裂解液,混匀后于56℃水浴中充分裂解5~20min;(2)在样品裂解液中加入结合液形成含磁性微粒-DNA复合物的混合溶液;(3)将磁性微粒-DNA复合物从混合溶液中分离;(4)清洗;(5)洗脱:加入洗脱液,使DNA从磁性微粒上洗脱下来,在外加磁场作用下将磁性微粒和洗脱下来的DNA分离,收集上清,即得纯化的DNA。本发明可满足从大样本量中成功提取高纯度的DNA;不需要离心机等大型仪器,操作步骤简便,时间短。 | ||
搜索关键词: | 磁性 微粒 大量 提取 dna 方法 | ||
【主权项】:
磁性微粒从生物样品中大量提取DNA的方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:(1)裂解样品:取一定量血液或组织样品,加入蛋白酶K溶液和浓度为3~6M的盐酸胍裂解液,混匀后于56℃水浴中充分裂解5~20min;所述血液样品体积为1~10ml,组织样品为100~1000mg;(2)形成含磁性微粒-DNA复合物的混合溶液:取0.4~6mg磁性微粒与结合液混合,并加入到裂解后的溶液中,振荡混匀,于室温充分结合,形成含磁性微粒-DNA复合物的混合溶液;(3)将磁性微粒-DNA复合物从混合溶液中分离:将混合溶液磁性分离,弃去上清,将磁性微粒-DNA复合物从混合溶液中分离出来,收集;(4)清洗:分别用2~40ml清洗液清洗收集的磁性微粒-DNA复合物,去除蛋白和其他杂质;所述清洗液为75%乙醇;(5)洗脱:在磁性微粒-DNA复合物中加入0.5~5ml洗脱液,让DNA从磁性微粒上洗脱下来,在外加磁场作用下将磁性微粒和洗脱下来的DNA分离,收集上清,即为纯化的DNA。
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