[发明专利]牛型结核菌素组分及活性的高效液相测定方法无效
| 申请号： | 200910259888.X | 申请日： | 2009-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN101718761A | 公开（公告）日： | 2010-06-02 |
| 发明（设计）人： | 张秀英;王在时;汪群杰;王宛;关孚时;陆连寿;戴志红;李翠;蒋卉 | 申请（专利权）人： | 中国兽医药品监察所 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人： | 郑明 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种牛型结核菌素组分及活性的高效液相测定方法。本发明采用高效液相法测定牛型提纯结核菌素就能完全将核酸和结核蛋白分开，实现了核酸和蛋白的分离，完全消除核酸对蛋白的影响，准确地体现核酸和结核蛋白的相对含量。目前提纯牛型结核菌素的效价采用豚鼠标定法，该方法试验方法复杂，操作繁琐，影响因素较多，测定结果误差较大，而本发明提供的方法能很简单直接的测出效价结果，方法简单，数据准确可靠。 | ||
| 搜索关键词： | 结核菌素 组分 活性 高效 测定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种牛型结核菌素组分及活性的高效液相测定方法，其特征在于：1)取提纯牛型结核菌素溶液，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.9万国际单位的溶液，精密量取10μL，注入液相色谱仪，色谱柱以5μm，![]()
的聚苯乙烯/二乙烯苯树脂颗粒作为填充剂，流动相为乙腈-水-三氟乙酸分别为25∶75∶0.1，检测器为紫外检测器，检测波长为271nm，流速为1.0mL/min，记录色谱图；2)另取提纯牛型结核菌素国际标准品，同法测定；3)根据液相色谱图中结核蛋白和核酸的峰面积，按峰面积归一化法计算结核蛋白和核酸的相对含量；根据标准品和供试品色谱图中结核蛋白的峰面积，按外标法计算牛型提纯结核菌素的效价。
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