[发明专利]重组生产的干扰素的提纯无效
申请号: | 200980152243.4 | 申请日: | 2009-12-17 |
公开(公告)号: | CN102264761A | 公开(公告)日: | 2011-11-30 |
发明(设计)人: | X.杨;G.J.韦耶坎普 | 申请(专利权)人: | 先灵公司 |
主分类号: | C07K14/56 | 分类号: | C07K14/56 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 万雪松;刘健 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明提供将所需干扰素同工型与不需要的干扰素同工型分离的方法,其包括对这些同工型施以阴离子交换柱色谱法和两阶段洗脱程序。在第一洗脱阶段中使用强洗脱溶液以促进所需同工型从该柱中洗脱,在第二阶段中使用弱洗脱溶液以抑制所需同工型的洗脱。 | ||
搜索关键词: | 重组 生产 干扰素 提纯 | ||
【主权项】:
在重组生产的IFN同工型的混合物中将干扰素(IFN)的氧化单体同工型与该IFN的一种或多种不需要的同工型分离的方法,该方法包括:(a)提供在第一缓冲液中的IFN同工型的混合物;(b)提供大于15厘米长并填充着用第一或第二缓冲液平衡的阴离子交换树脂的色谱柱;(c)将缓冲的IFN溶液加载到该阴离子交换柱上;(d)用洗涤溶液洗涤该加载后的柱;(e)将该柱的1至10床体积的量的强洗脱溶液施加到该洗过的柱上,其中该强洗脱溶液包含10至30 mM的第一磷酸盐浓度并具有5.4至6.6的pH;(f)对来自步骤(e)的柱施加该柱的2至20床体积的量的弱洗脱溶液,其中该弱洗脱溶液包含小于第一磷酸盐浓度的第二磷酸盐浓度并具有5.4至6.6的pH;和(g)收集含有氧化IFN单体同工型的多个洗脱级分。
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