[发明专利]一种猪羊水干细胞系的建立及检测方法无效
| 申请号： | 201010013576.3 | 申请日： | 2010-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN101798566A | 公开（公告）日： | 2010-08-11 |
| 发明（设计）人： | 王华岩;卢智娟;成德;张淑金;高志敏 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12R1/91 |
| 代理公司： | 西安智邦专利商标代理有限公司 61211 | 代理人： | 康凯 |
| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种猪羊水干细胞系的建立方法，该方法包括以下步骤：1)羊水干细胞的原代分离培养；2)将分离培养的原代羊水干细胞进行机械分离纯化；3)检测并将分离纯化后的羊水干细胞进行培养，建立猪羊水干细胞系，本发明提供了一种快速、有效、安全、分离猪羊水干细胞的方法，可为组织工程研究提供新的种子细胞来源以及有望作为种子细胞从事科研和生产应用。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 羊水 细胞系 建立 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种猪羊水干细胞系的建立方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：1)羊水干细胞的原代分离培养；2)将分离培养的原代羊水干细胞进行机械分离纯化；3)将分离纯化后的羊水干细胞进行培养和检测，建立猪羊水干细胞系，其具体实现方式是：3.1)待分离纯化后的羊水干细胞长至融合时，弃去培养液，用PBS洗2-3遍，然后用0.25％胰蛋白酶+0.04％EDTA细胞消化液在38℃条件下消化3-4分钟；3.2)等量细胞培养液中止消化；3.3)将经过消化的羊水干细胞在1000r/min离心5-10分钟；3.4)弃上清，计数，调整细胞浓度为1.0×105个/ml将细胞悬液接到培养皿上，加细胞培养液；3.5)连续培养4-8代后，上皮样细胞逐渐减少消失，90％以上表现为成纤维样细胞，细胞大量扩增，即建成羊水干细胞系。
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