[发明专利]一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白的制备方法及其用途有效
| 申请号： | 201010028904.7 | 申请日： | 2010-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN101921733A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 陈霄;周子华;廖玉华;陈芬;王敏;刘祖霞;邱志华;张晓丽 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;A61K39/00;A61P31/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 王和平 |
| 地址： | 430022 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白，按如下方法制备：步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后，克隆至原核表达载体pET28a(+)中，得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP；步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置，即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间，插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT，并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中，得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1；步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌，诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。使用异双功能交联剂将短肽抗原耦联至Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 aa 噬菌体 病毒 颗粒 蛋白 制备 方法 及其 用途 | ||
【主权项】：
一种Qβ 2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白，按如下方法制备：步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后，克隆至原核表达载体pET28a(+)中，得到编码CP蛋白质粒pETQβ CP；步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置，即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间，插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT，并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T 2中，得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ A1；步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌，诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ 2aa。
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