[发明专利]一种高效生产纤维素酶的方法

摘要

本发明提供了一种生产纤维素酶的方法，包括以下步骤：将里氏木霉(Trichoderma reesei)接种至发酵培养基中，发酵60～90小时后开始流加培养，流加培养过程中，当发酵液pH值高于4.8时，流加培养基，当发酵液pH值低于4.5时，停止流加培养基，总发酵时间达到192～240小时，停止发酵。本发明方法将不溶性碳源和可溶性碳源有机结合，协同诱导纤维素酶基因的表达。通过流加培养使菌种的生长与目的代谢产物的形成过程达到协调平衡，解决了单纯以纤维素或可溶性糖为诱导物生产纤维素酶的工艺中存在的问题，有效提高了纤维素酶的发酵水平，而且获得的纤维素酶对纤维素底物的降解性能较强。

主权项

一种高效生产纤维素酶的方法，包括以下步骤：将里氏木霉(Trichoderma reesei)接种至发酵培养基中，发酵60～90小时后开始流加培养，流加培养过程中，当发酵液pH值高于4.8时，流加培养基，当发酵液pH值低于4.5时，停止流加培养基，总发酵时间达到192～240小时，停止发酵；所述的发酵培养基配方为：可溶性碳源10～25g/L、不溶性碳源20～35g/L、硫酸镁0.5～1.0g/L、磷酸二氢钾4～8g/L、土温801～4g/L、酵母粉15～20g/L，蛋白胨10～15g/L、硫酸铵2～4g/L、氯化钙0.2～0.8g/L、FeSO4·7H2O 3～7mg/L、ZnSO4·7H2O 1～2mg/L，MnSO4·H2O 1～2mg/L、CoCl2·6H2O 3～4mg/L、钼酸铵1～2mg/L、H3BO30.2～0.6mg/L；流加培养过程中流加的培养基配方为：可溶性碳源100～250g/L、不溶性碳源20～40g/L、硫酸镁3～4g/L、磷酸二氢钾18～26g/L、土温801～4g/L、酵母粉60～80g/L、蛋白胨40～60g/L、硫酸铵10～15g/L、氯化钙1.5～2.5g/L、FeSO4·7H2O 15～25mg/L、ZnSO4·7H2O 5～6mg/L、MnSO4·H2O 6～7mg/L、CoCl2·6H2O 12～16mg/L、钼酸铵4～8mg/L、H3BO31～3mg/L。