[发明专利]一对部分同序引物减少其二聚体的方法

摘要

本发明“一对部分同序引物减少其二聚体的方法”，根据发明人的发现‑没有连续互补碱基的引物对沿5’‑3’方向平行配对形成多处间隔氢键的合力促使它们3’末端个别互补碱基形成氢键使末端结合延伸成二聚体；和单一引物自身不形成二聚体的现象。尽最大比例设计PCR引物对近似单一引物。其特征在于PCR引物对中间沿5’‑3’方向预设一段4‑10bsae同样序列，所述引物对3’末端1‑5base避免间隔互补碱基，所述5’端区避免3个以上的间隔互补碱基，最好5’端完全同序。可极大减少引物二聚体形成，优化PCR质量，尤其是荧光染料实时PCR。

主权项

一对部分同序引物减少其二聚体的方法，其特征是选取PCR扩增引物对的基本原则是以部分同序引物模拟或近似单一引物，所述PCR引物对中间区域沿5’‑3’方向选用一段4‑10碱基同样序列以分散引物链多处间隔互补碱基所形成氢键的合力；所述引物3’末端预留1‑5碱基，其一3’最末端与另一条3’末端最后两个碱基绝对避免互补，也要避免有间隔的碱基互补；所述中间部份同序引物对5’端区域沿5’‑3’方向平行比对，不要有3个以上间隔碱基互补；从而减少PCR应用上的非特异性。