[发明专利]小鼠肝炎病毒实时荧光定量PCR检测方法有效
申请号: | 201010110268.2 | 申请日: | 2010-02-03 |
公开(公告)号: | CN101914631A | 公开(公告)日: | 2010-12-15 |
发明(设计)人: | 潘振华;陈林凤;张红;盛青松 | 申请(专利权)人: | 无锡奥瑞生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人: | 曹祖良 |
地址: | 214091 江苏省无锡市滨湖区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种小鼠肝炎病毒实时荧光定量PCR检测方法。该方法包括标准质粒的构建、特异性引物及荧光探针的设计、实时荧光定量PCR扩增及建立检测标准曲线、感染病毒样本的RNA提取及cDNA的制备以及有效性验证及结果检测判定步骤;其中特异性引物的正向引物的序列为:5’-CCCGAAGTGGTTAGTGAAGG-3’,反向引物的序列为:5’-CATGGCCCTATAATACGGGT-3’;所述荧光探针的序列为:5’-CTCGCTCTATGACCTACTGC-3’。本发明检测灵敏度高,检测时间短,可同时进行大批量的样本分析,具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,适用于病毒感染的前期诊断。 | ||
搜索关键词: | 小鼠 肝炎 病毒 实时 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
小鼠肝炎病毒实时荧光定量PCR检测方法,包括有标准质粒的构建、特异性引物及荧光探针的设计、实时荧光定量PCR扩增及建立检测标准曲线、感染病毒样本的RNA提取及cDNA的制备、有效性验证及结果检测判定,其特征在于,所述特异性引物包含有正向引物(PrimerF)、反向引物(PrimerR),其中正向引物的序列为:5’ CCCGAAGTGGTTAGTGAAGG 3’,反向引物的序列为:5’ CATGGCCCTATAATACGGGT 3’;所述荧光探针的序列为:5’ CTCGCTCTATGACCTACTGC 3’。
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