[发明专利]一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法无效
| 申请号： | 201010113861.2 | 申请日： | 2010-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN101899470A | 公开（公告）日： | 2010-12-01 |
| 发明（设计）人： | 向太和;孟莎莎;王琳 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/06;A01K67/033 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;冷红梅 |
| 地址： | 310036 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法。本发明首先利用发根农杆菌K599侵染黄瓜子叶，高频诱导出不定根，离体子叶生根频(转基因频率)达90％，诱导出的不定根在荧光显微镜下能发出强烈的绿色荧光。利用诱导出的黄瓜不定根对南方根结线虫进行了繁殖，成功形成了根结，达到了繁殖根结线虫的目的，可为研究根结线虫的防控提供大量的、均一的根结线虫实验材料，克服了实生苗繁殖根结线虫受到季节限制和土壤环境生物因子的影响。而且，有利于根结线虫的长期保存、可以随要随取，并且不同种的根结线虫之间易于标识、操作中不易混淆，为快速、高效繁殖和分离根结线虫提供了一条新途径。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 转基因 不定根 繁殖 线虫 方法 | ||
【主权项】：
一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法，所述方法包括：(1)用发根农杆菌K599侵染带有伤口的黄瓜子叶，侵染后的黄瓜子叶于含乙酰丁香酮25mg/L的MS培养基中共培养2～3天后，用含头孢霉素500mg/L的MS培养基清洗，再转入含卡那霉素50mg/L+头孢霉素500mg/L的MS培养基中进行诱导培养，诱导出的不定根经除菌和繁殖，获得转基因不定根于MS培养基中繁殖保存；(2)分离根结线虫的卵囊，经消毒后接种至培养于MS培养基中的转基因不定根上，于20～25℃下进行培养30～50天，在形成的根结中获得根结线虫。
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