[发明专利]基于蛋白质三聚化模序的高分泌性三聚体蛋白的表达方法有效
| 申请号： | 201010133096.0 | 申请日： | 2010-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN101948864A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 凌虹;王甲业;李妍;陈文江;杨丹;程德春 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/79 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;费碧华 |
| 地址： | 150081 黑*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高分泌性三聚体蛋白的表达方法。该表达方法包括：(1)将tPA信号肽基因序列、目的蛋白基因和蛋白质三聚化模序基因序列连接在一起；其中，目的蛋白的N末端与tPA信号肽相连，其C末端与蛋白质三聚化模序蛋白N末端相连；(2)将融合基因克隆至原核或真核表达载体，得到融合蛋白原核或真核表达载体；(3)体内或体外表达融合蛋白，即得。本发明通过向目的蛋白的氨基端引入一个组织性纤溶酶原激活物tPA的信号肽序列以及向其羧基端引入一个三聚化蛋白模序MTI，实现目的蛋白在原核或真核细胞高水平分泌及三聚化表达，获得功能性蛋白。本发明可广泛用于天然以三聚体形式存在的病毒以及其他蛋白在原核或真核细胞的分泌性高水平表达。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 蛋白质 三聚 化模序 分泌 三聚体 蛋白 表达 方法 | ||
【主权项】：
一种高分泌性三聚体蛋白的表达方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将tPA信号肽基因序列、目的蛋白基因序列和蛋白质三聚化模序基因序列连接在一起，得到融合基因；其中，目的蛋白的N末端与tPA信号肽相连，目的蛋白的C末端与蛋白质三聚化模序蛋白N末端相连；(2)将步骤(1)所得到的融合基因克隆至原核或真核表达载体，构建得到融合蛋白原核或真核表达载体；(3)利用原核或真核表达系统，体内或体外表达融合蛋白，即得。
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