[发明专利]一种大规模生产动物用狂犬病毒抗原的方法无效
| 申请号： | 201010135137.X | 申请日： | 2010-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN101851610A | 公开（公告）日： | 2010-10-06 |
| 发明（设计）人： | 张许科;孙进忠;乔荣岑;陶家权;王进产;张海洋;习向锋;李三 | 申请（专利权）人： | 洛阳普莱柯生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人： | 韩登营 |
| 地址： | 471003 河南省洛*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种大规模生产动物用狂犬病毒抗原的方法，利用生物反应器，以细胞微载体悬浮培养系统大规模生产狂犬病毒抗原：将制备抗原用细胞接种到含有培养液与微载体的载体罐中，使细胞贴附在微载体上；在适当培养环境下，使细胞在上述微载体上生长至接种浓度的5～40倍；将狂犬病毒制成病毒悬液，使其吸附到上述细胞上；换用细胞维持培养液，在适当培养环境下培养病毒；连续培养3～5日后，第一次收获病毒液，采用半连续工艺，换液比例为50％；继续培养9～11日，每24h收获换液一次；将收获的病毒液与生物反应器的病毒液混合，于-20℃冻融两次，灭活纯化得到狂犬病毒抗原。该方法生产规模大、单批次产量高、生产成本相对较低。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大规模 生产 动物 狂犬病毒 抗原 方法 | ||
【主权项】：
一种狂犬病毒抗原的制备方法，利用生物反应器，以细胞微载体悬浮培养系统大规模生产狂犬病毒抗原，包括如下技术步骤：(1)培养制备抗原用细胞将可增殖狂犬病毒的细胞系接种到含有培养液与微载体的载体罐中，并将上述细胞与微载体混合均匀，启动贴附程序，使细胞贴附在微载体上；切换细胞培养程序，在适当培养环境下，提供上述细胞足够的养分和适宜的气体环境，使细胞在上述微载体上生长至接种浓度的5～40倍；(2)毒液的接种与繁殖将狂犬病毒制成病毒悬液，使其吸附到上述细胞上；换用细胞维持培养液，在适当培养环境下培养病毒；连续培养3～5日后，第一次收获病毒液，采用半连续工艺，换液比例为50％；继续培养9～11日，每24h收获换液一次，换液比例为50％；(3)经检验合格后，将半连续工艺收获的病毒液与生物反应器的病毒液混合，于-20℃冻融两次，灭活纯化得到狂犬病毒抗原。
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