[发明专利]RYR1基因SNP检测特异性引物、液相芯片和检测方法

摘要

本发明公开了RYR1基因SNP检测特异性引物、液相芯片和方法，所述液相芯片包括针对每种型别的突变位点分别设计的野生型和突变型ASPE引物对、分别包被有特异的anti-tag序列的微球，和用于分别扩增具有G341R、R614C、T2206M和/或G2434R位点的RYR1基因目标序列的引物。所制备的RYR1基因SNP检测液相芯片具有非常好的信号-噪声比，并且所设计的探针以及anti-tag序列之间基本上不存在交叉反应。本发明设计的ASPE引物具有非常好的特异性，能准确区分各种类型的突变位点。所述检测方法步骤简单，4种SNP位点可以一步检测完成，操作方便，并且避免了多次操作过程中存在的诸多不确定因素，因而可大大提高检测准确率。

主权项

一种RYR1基因SNP检测液相芯片，其特征是，主要包括有：(A).针对RYR1基因的SNP位点分别设计的ASPE引物对：每种ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因SNP位点的特异性引物序列组成，所述特异性引物序列分别为：针对G341R位点的SEQ ID NO.9及SEQ ID NO.10、针对R614C位点的SEQ ID NO.11及SEQ ID NO.12、针对T2206M位点的SEQ ID NO.13及SEQ ID NO.14；和/或针对G2434R位点的SEQ ID NO.15及SEQ ID NO.16；所述tag序列选自SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.8中的序列；(B).分别包被有特异的anti-tag序列的微球，上述每种微球具有不同颜色编码；所述anti-tag序列选自SEQ ID NO.17～SEQ ID NO.24中的序列，且所述anti-tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列互补配对；(C).用于分别扩增具有G341R、R614C、T2206M和/或G2434R SNP位点的RYR1基因目标序列的扩增引物。