[发明专利]利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法

摘要

本发明公开了一种利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法，将待测的实验组蛋白质溶液和若干已知浓度的标准组蛋白质溶液滴加在硝酸纤维素膜上；晾干后放入戊二醛溶液，加热后清洗；检测样品的荧光强度，根据标准组已知蛋白质浓度与荧光强度绘制的标准曲线和实验组蛋白质样品的荧光强度计算实验组蛋白质浓度。本发明体现了降低成本，提高速度，减少操作时间，利于批量操作。

主权项

利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法，其特征在于包括下述步骤：1)将待测的未知浓度的实验组蛋白质溶液和1组至少4个已知浓度且浓度不同的标准组蛋白质溶液各0.5-2μL滴加在硝酸纤维素膜上；2)将硝酸纤维素膜自然晾干；3)将硝酸纤维素膜整个放入质量百分比浓度为0.1％～10％的戊二醛溶液，将溶液和硝酸纤维素膜加热至40℃～80℃，并保温5～60分钟；4)用磷酸盐缓冲液或水或生理盐水清洗硝酸纤维素膜两次以上；5)使用红外激光扫描成像系统，选择660nm-710nm之间任一波长激光激发，在大于激发激光波长至少40nm处检测硝酸纤维素膜上各蛋白质溶液斑点的荧光强度；6)结合标准组已知蛋白质浓度与荧光强度绘制标准曲线，得到荧光强度I校准与蛋白质溶液浓度N标准的关系公式：I标准＝a×N标准+b，其中a为一元线性相关系数，b为截距，皆通过标准曲线计算得知；7)根据标准曲线和实验组蛋白质溶液斑点的荧光强度I实验计算实验组蛋白质溶液浓度N实验，即N实验＝(I实验-b)/a。