[发明专利]一种产油微生物RNA的提取方法无效

专利信息
申请号: 201010176579.9 申请日: 2010-05-19
公开(公告)号: CN102250875A 公开(公告)日: 2011-11-23
发明(设计)人: 唐伟;张素芳;谭海东 申请(专利权)人: 中国科学院大连化学物理研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 代理人: 马驰
地址: 116023 *** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明公开了一种从产油微生物中提取RNA的方法。该方法包括以下步骤:产油微生物菌体采用液氮研磨和玻璃珠振荡相结合的方式进行细胞破碎,在细胞破碎液中加入有机溶剂去除油脂,加入酸性苯酚/氯仿/异戊醇除去蛋白,离心取水相加入异丙醇沉淀,最后经乙醇洗涤沉淀,真空干燥,可成功提取产油微生物RNA。本发明操作简单,成本低,完整性好。采用本方法获得的RNA,可以满足产油微生物分子生物学如Northern杂交、mRNA分离、RACE、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等方面的研究。
搜索关键词: 一种 产油 微生物 rna 提取 方法
【主权项】:
一种从产油微生物中提取高质量RNA的方法,其特征在于:产油菌体首先采用液氮研磨成粉末、然后于RNA提取缓冲液中采用玻璃珠振荡进行细胞破碎,得细胞破碎液;在细胞破碎液中加入有机溶剂去除油脂,离心后取水相,加入醋酸钠、酸性苯酚、氯仿和异戊醇除去胞内蛋白,离心后取水相加入异丙醇沉淀RNA,洗涤沉淀,真空干燥后加入DEPC处理水溶解。
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