[发明专利]一种小RNA的定量检测方法及试剂盒有效
申请号: | 201010183196.4 | 申请日: | 2010-05-19 |
公开(公告)号: | CN101831500A | 公开(公告)日: | 2010-09-15 |
发明(设计)人: | 张必良;冯世鹏 | 申请(专利权)人: | 广州市锐博生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510663 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了可用于对小RNA进行表达分析的一种小RNA的定量检测方法和试剂盒,该方法通过bulge loop RT引物将小RNA反转录为cDNA,加入PCR正向引物和PCR通用反向引物进行定量PCR扩增。本发明所述的小RNA的定量检测方法和试剂盒具有灵敏度高,特异性好和试剂盒价廉等优点,且可用于批量检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 rna 定量 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种小RNA的定量检测方法,其特征是,包括以下步骤:(1)bulge loop RT引物将小RNA反转录为cDNA,所述bulge loop RT引物具有40-60个核苷酸,从5’端至3‘端有分别为茎1部分,bulge部分,茎2部分,环部分,茎3部分及延伸部分;茎3部分与茎1和茎2部分互补配对,延伸部分能与小RNA互补配对;(2)加入PCR正向引物和PCR通用反向引物进行定量PCR扩增,正向PCR引物为具有20-40个核苷酸序列,从5’端至3‘端分别为延伸部分和小RNA相似部分;小RNA相似部分为小RNA的cDNA的互补序列的一部分,其长度与bulge loop RT引物延伸部分的长度之和要大于或等于小RNA的全长;PCR反向通用引物长度为具有20-40个核苷酸的序列。
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