[发明专利]一种筛选鉴定粘附蛋白的方法无效
| 申请号： | 201010194953.8 | 申请日： | 2010-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN101881751A | 公开（公告）日： | 2010-11-10 |
| 发明（设计）人： | 魏华;徐锋;彭珍;谭强来;徐迪;陈廷涛;熊勇华 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | G01N27/62 | 分类号： | G01N27/62;G01N27/447 |
| 代理公司： | 南昌洪达专利事务所 36111 | 代理人： | 刘凌峰 |
| 地址： | 330000 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 一种筛选鉴定粘附蛋白的方法，其特征是方法步骤为：羧化表面的磁珠经碳二亚胺和硫代羟基琥珀酰亚胺处理后，与肠上皮细胞碎片共价偶联形成酰胺键，洗涤干净磁珠后，与益生菌表面蛋白溶液共孵育1h后，PBS缓冲液洗3遍，除去未粘附的表面蛋白，采用50mM、pH 2.3的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱粘附蛋白，SDS-PAGE电泳后质谱测序，鉴定此粘附蛋白。本发明的优点是：磁珠法利用粘附蛋白可粘附肠上皮细胞的特性，把功能与分离结合于一步操作中，大大提高了粘附蛋白筛选的效率，可高效高通量地筛选鉴定粘附蛋白，与传统的层析方法比较，费用低廉，省时省事，可一步筛选鉴定多个粘附蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 鉴定 粘附 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种筛选鉴定粘附蛋白的方法，其特征是方法步骤为：羧化表面的磁珠经碳二亚胺和硫代羟基琥珀酰亚胺处理后，与肠上皮细胞碎片共价偶联形成酰胺键，洗涤干净磁珠后，与益生菌表面蛋白溶液共孵育1h后，PBS缓冲液洗3遍，除去未粘附的表面蛋白，采用50mM、pH 2.3的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱粘附蛋白，SDS-PAGE后质谱测序，鉴定此粘附蛋白。
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