[发明专利]一种新型链霉菌分泌表达质粒及应用无效

专利信息
申请号: 201010196933.4 申请日: 2010-06-10
公开(公告)号: CN102002510A 公开(公告)日: 2011-04-06
发明(设计)人: 洪斌;朱元军;王丽非;杜郁;余腾斐;王松梅 申请(专利权)人: 中国医学科学院医药生物技术研究所
主分类号: C12N15/76 分类号: C12N15/76;C12N1/21;C12P21/00;C12R1/465
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 代理人: 程泳
地址: 100050*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种新的链霉菌分泌表达质粒及其应用。具体地,本发明提供的质粒以球孢链霉菌C-1027中天然存在的pSGL1质粒最小复制子为骨架,克隆有大肠杆菌复制起始区ori、链霉菌接合转移的必需区oriT、氨苄青霉素抗性基因bla、阿普霉素抗性基因aac(3)IV、启动子ermE*p、力达霉素辅基蛋白基因启动子cagAp、力达霉素辅基蛋白基因突变型信号肽SPcagA(CTG)和多克隆位点。该质粒可应用于在链霉菌中高效分泌表达各种异源蛋白。
搜索关键词: 一种 新型 霉菌 分泌 表达 质粒 应用
【主权项】:
一种表达载体,其为环状,且可操作地连接有:源于pSGL1的复制子序列:其由SEQ ID NO:1中第5086‑7372位所示序列的互补序列构成;大肠杆菌复制起始区ori序列:其由SEQ ID NO:1中第2497‑3164位所示序列构成;氨苄青霉素抗性基因bla序列:其由SEQ ID NO:1中第3315‑4172位所示序列的互补序列构成;多克隆酶切位点序列:其由SEQ ID NO:1中第1452‑1481位所示序列构成;阿普霉素抗性基因aac(3)IV序列:其由SEQ ID NO:1中第204‑980位所示序列的构成;源于链霉菌接合转移的必需区oriT序列:其由SEQ ID NO:1中第8602‑8713位所示序列构成;cagAp和ermE*p串联的强启动子序列:其由SEQ ID NO:1中第1581‑2057位所示序列的互补序列构成;和信号肽序列:其由SEQ ID NO:1中第1482‑第1580位所示序列的互补序列构成或者由SEQ ID NO:1中第1482‑第1580位所示序列中第1572位至第1574位的CTG替换为TTA的互补序列构成。
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