[发明专利]淋巴瘤相关的融合基因的联合检测方法及诊断试剂盒

摘要

本发明公开了一种淋巴瘤相关的融合基因的联合检测方法及诊断试剂盒，通过对淋巴瘤相关的融合基因API2-MALT1(A1446-M814)、API2-MALT1(A1446-M1123)、API2-MALT1(A1446-M1150)、NPM-ALK设计引物和探针，将探针与微球共价结合形成的探针微球混合物，与逆转录PCR扩增产物杂交，加入链霉亲和素藻红蛋白后，可检测出不同微球的荧光信号，从而确定待检测样品中是否含有淋巴瘤相关的融合基因及融合基因的表达状况。本发明所述的方法及试剂盒具有高灵敏度、高通量性、检测快速、准确等优点，能够对多种淋巴瘤融合基因同时进行定性和定量检测。

主权项

一种淋巴瘤相关的融合基因的联合检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)包含多种不同荧光编码的羧基微球Beads，每种微球上分别共价结合针对淋巴瘤中染色体易位形成的多种融合基因的mRNA所设计的特异性核酸探针；所述的淋巴瘤中染色体易位形成的多种融合基因包含以下任意一种基因或任意组合的多种基因：API2‑MALT1(A1446‑M814)、API2‑MALT1(A1446‑M1123)、API2‑MALT1(A1446‑M1150)、NPM‑ALK；(2)针对不同淋巴瘤类型中染色体易位所形成的多种融合基因的mRNA，分别设计上下游引物，对不同的融合基因mRNA，通过逆转录PCR扩增出相应的产物；(3)含有特异性核酸探针的微球与融合基因mRNA的逆转录扩增产物混合杂交，加入链霉亲和素‑藻红蛋白Streptavidin‑PE后，通过液相芯片xMAP方法检测荧光信号；(4)将检测到的荧光信号与内参基因的荧光信号进行比较，从而确定检测样品中是否存在淋巴瘤相关的融合基因，和/或样品中融合基因的表达状况。